現(xiàn)代高效液相色譜分析中,，色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間，并且使方法更具穩(wěn)定性,。但是現(xiàn)在市場上色譜柱種類繁多,，不同類型的色譜柱分離對象不同，因此,，要做合適的選擇,，必須對此有一定的認(rèn)識和了解。
柱長，內(nèi)徑,，如250*4.6mm,。一般柱長在2—250mm，柱越長,，分離度越高,，但柱壓更高，分離所需時間更長,；但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比,，所以一昧增加柱長并不是*的分離手段，一般情況下,，150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù),。
粒徑,，影響色譜分離度。粒徑越小,，分離越快,，柱效越高，但柱壓力越高,，柱容易被污染,，導(dǎo)致柱壽命降低。常見分析柱通常使用5um填料,，復(fù)雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑,，更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑。如果固定相選擇是正確,，但是分離度不夠,，那么選用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%,；然而,，3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍，因此如何選擇填料粒徑需要根據(jù)現(xiàn)實情況而定,。本文來源于國內(nèi)的第三方檢測平臺嘉峪檢測網(wǎng),，提供檢測實驗、技術(shù)培訓(xùn),、儀器計量校準(zhǔn)服務(wù),。
孔徑，60A,，120A,，300A等。孔徑小,，則含孔率高,，比表面積大，載碳量高,；色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配,，保證分子自由進出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進行分離分配，通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上,，一般小分子使用80—120A,，大分子使用300A。
顆粒形狀,，一般有球形和不規(guī)則形,，當(dāng)使用黏度較大的流動相時，球形顆?？梢越档椭鶋?，延長色譜柱壽命。
比表面積,，指的是每克填料的表面積,，如180m2/g—350m2/g，與粒度和含孔率有關(guān),；比表面積大,，會增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保留和分離度,；比表面積小則可以縮短分析時間和平衡時間,，并不是比表面積大或者小就更好，需要選擇合適的比表面積,。
硅膠基質(zhì)：通用的基質(zhì),，強度大，化學(xué)修飾容易,，但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,，特殊修飾的可以達到1—12)。
聚合物基質(zhì)：多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,，化學(xué)穩(wěn)定,，應(yīng)用pH范圍寬，具有更強的疏水性,，對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好,；但強度較小，有機溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損,，批次重復(fù)性較差,，商品化色譜柱不多,，一般價格較貴。
載碳量：基質(zhì)表面鍵合相的比例,，載碳量高,，則保留增加，適合分析非極性化合物,。
鍵合相：鍵合試劑不同,，對化合物的選擇性不同，一般長鏈的烷基鍵合相(C18C8)比短鏈的(C4C3)穩(wěn)定,；非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定,。
封端：用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來，以減少殘留的硅醇基,，減輕待測組分與酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象,。尤其對于極性樣品而言，未封端處理的色譜柱分離效果較差,?！?/span>
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