填充劑的要求
zui常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠,。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑,，以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠（如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等）也有使用,。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑,，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑,；分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑,；對映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。
填充劑的性能（如載體的形狀,、粒徑,、孔徑、表面積,、鍵合基團(tuán)的表面覆蓋度,、含碳量和鍵合類型等）以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果,?？讖皆?5nm（1nm=10Å）以下的填料適合于分析分子量小于2000 的化合物，分子量大于2000 的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm 以上的填料,。除另有規(guī)定外,，分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm 之間。粒徑更?。s2μm）的填充劑常用于填裝微徑柱（內(nèi)徑約2mm）,，使用微徑柱時(shí)，輸液泵的性能,、進(jìn)樣體積,、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配,；如有必要，色譜條件也需作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整,。當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時(shí),，應(yīng)以品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。
溫度的要求
以硅膠為載體的普通鍵合固定相的使用溫度通常不超過35℃,，為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的使用溫度,，但不能超過60℃。
流動相的要求
流動相的pH 值應(yīng)控制在2～8 之間,。當(dāng)pH 值大于8 時(shí),，可使載體硅膠溶解；當(dāng)pH 值小于2 時(shí),，與硅膠相連的化學(xué)鍵合相易水解脫落,。當(dāng)色譜系統(tǒng)中需使用pH 值大于8 的流動相時(shí)，應(yīng)選用耐堿的填充劑,，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠填充劑,、包覆聚合物填充劑,、有機(jī)-無機(jī)雜化填充劑或非硅膠填充劑等,；當(dāng)需使用pH 值小于2 的流動相時(shí)，應(yīng)選用耐酸的填充劑,，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護(hù)作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑,，或有機(jī)-無機(jī)雜化填充劑等。
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