液相色譜儀 -發(fā)展歷史 1960年代,，由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性，為了分離蛋白質,、核酸等不易氣化的大分子物質,，氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland),、哈伯,、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯,、里普斯克等人開發(fā)了世界上*臺液相色譜儀,，開啟了液相色譜的時代。液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,，提高色譜柱的塔板數(shù),，以高壓驅動流動相，使得經典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內完成,。
1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實踐》一書,，標志著液相色譜法 (HPLC)正式建立。在此后的時間里,，液相色譜成為zui為常用的分離和檢測手段,，在有機化學,、生物化學、醫(yī)學,、藥物開發(fā)與檢測,、化工、食品科學,、環(huán)境監(jiān)測,、商檢和法檢等方面都有廣泛的應用。液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料,、檢測技術,、數(shù)據(jù)處理技術以及色譜理論的發(fā)展。
1960年代前,，使用的填充粒大于100μm,，提高柱效面臨著困境，后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸,?？瓶颂m、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相,，這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼,，實現(xiàn)了高速傳質，為液相色譜技術的發(fā)展奠定了穩(wěn)固的基礎,。隨著填料粒徑的降低,，更高的柱效也得以實現(xiàn),。1960年代研制出氣動放大泵,、注射泵及低流量往復式柱塞泵，但后者的脈沖信號很大,，難以滿足液相色譜的要求,。1970年代，往復式雙柱塞恒流泵,，解決了這一問題,。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠，平均粒徑只有7μm,，具有*的柱效,，并逐漸取代了無定形微粒硅膠。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩(wěn)定性大為提高,，多次使用成為可能,。1970年后，適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點,。1980年后,，改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問題,，人們越來越認識到改變流動相的組成是提高選擇性的關鍵。
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