農(nóng)殘速測試劑（國標(biāo)） 農(nóng)藥殘留測試劑

建立和實(shí)施農(nóng)產(chǎn)品的市場準(zhǔn)入制度是當(dāng)前的一項(xiàng)重要工作，蔬菜中農(nóng)藥殘毒的快速檢測是其中一個(gè)重要環(huán)節(jié)，國家質(zhì)檢總局標(biāo)準(zhǔn)委員會為此頒布了《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測》 GB/T5009.199-2003國家標(biāo)準(zhǔn),。本產(chǎn)品為該標(biāo)準(zhǔn)方法的配套試劑，酶活性和對農(nóng)藥敏感性等指標(biāo)均達(dá)到或超過了標(biāo)準(zhǔn)的要求,，可以在各種型號的農(nóng)殘檢測儀（分光光度法）上使用,，具有穩(wěn)定性好、靈敏度高

1 、原理

    在一定條件下,，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物 （ 乙酰膽堿 ） 水解,，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì),，用分光光度計(jì)測定 412nm 下的吸光度隨時(shí)間的變化值,，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在,。

2 ,、試劑配制及保存

特別提示：本試劑盒可適用于不同廠家的各種型號農(nóng)殘檢測儀及分光分度計(jì)，儀器操作根據(jù)其配套說明書方法,，農(nóng)殘檢測方法根據(jù)本試劑盒提供方法操作,。

緩沖液： 取 1 包緩沖劑加入 500mL 純凈水中，攪拌溶解制成磷酸緩沖液 （pH 8.0） , 常溫保存,。
顯色劑： 取 1 瓶顯色劑加 25mL 磷酸緩沖液溶解,，使用時(shí)取 100 μ L 避光、 4 ℃保存,。
底 物： 取 1 瓶底物加 12.5mL 蒸餾水溶解，使用時(shí)取 100 μ L ,， 4 ℃冰箱保存,；
或 取 1 瓶底物加 2.5mL 蒸餾水溶解 ，使用時(shí)取 20 μ L ,， 4 ℃冰箱保存,；
膽堿酯酶 ： 酶制劑無需配制，可直接取用,， 4 ℃保存,。

3 、樣品提取

    取 2g 果蔬樣品（塊莖類取 4g ）剪成 1cm 左右見方碎片,，放入小燒杯（或取樣瓶）中,；加入 10mL 緩沖液，振蕩 1min～2min ,，倒出提取液,，靜置 2min 待測；

4 ,、測試

對照測試： 于反應(yīng)瓶中加入 2.5mL 緩沖液,， 再分別加入 100 μ L 顯色劑和酶液，混勻，靜置預(yù)反應(yīng) 10min 后加入 100 μ L（或20μL）底物,，搖勻并立即倒入比色杯中,，放入測試通道， 按儀器“對照”鍵測試 1min的吸光度變值 ΔΑ 0 .

樣品測試： 于反應(yīng)瓶中加入 2.5 mL 待測液,， 其他操作與對照測試相同,，測試 1 min的吸光度變化值 ΔΑ t .

結(jié)果判定： 以分光光度計(jì)測試 （412 nm 波長 ） 時(shí)，按以下公式計(jì)算出抑制率 : 抑制率 （%）=[（ ΔΑ 0 －ΔΑ t ）/ ΔΑ 0 ]×100 ,；以農(nóng)殘檢測儀檢測時(shí)其抑制率一般可自動計(jì)算,。若樣品抑制率≥50%，表示被測果蔬農(nóng)殘超標(biāo),，為陽性結(jié)果,。陽性結(jié)果的樣品需做 2 次以上重復(fù)檢測，多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn),。

小提示 1 ： 本試劑盒可在常溫條件下進(jìn)行檢測,，并可以滿足 GB/T 5009.199-2003 方法的要求。采用國標(biāo)方法時(shí),，預(yù)反應(yīng)時(shí)間為 15 min ,，條件為 3 7℃水浴或恒溫培養(yǎng)箱；測試反應(yīng)時(shí)間為3 min. 其余與上述方法相同,。

小提示 2 ： 檢測時(shí)對照與樣品可同時(shí)檢測,，而無需將兩者分開兩次檢測，每批檢測的時(shí)間應(yīng)控制*,，否則不具有可比性,。

小提示 3 ： 底物的使用量根據(jù)配制時(shí)的體積決定，若稀釋成 12.5mL/瓶,，則使用時(shí)加入100μL,；若稀釋成2.5mL/瓶，則使用時(shí)加入20μL,；國標(biāo)方法中底物的使用量100μL.

小提示 4 ： 在加底物的環(huán)節(jié)中,，可預(yù)先將底物加入比色杯，待靜置時(shí)間一到,，馬上將反應(yīng)瓶中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色杯,，并迅速放入測試通道進(jìn)行測試。這樣可以減少同時(shí)檢測多個(gè)樣品時(shí)因加底物時(shí)間過長而造成的誤差,。

5 ,、注意事項(xiàng)：

    保存：試劑盒包含緩沖劑 10 包，膽堿酯酶 10 瓶,，顯色劑 2 瓶,，底物 4 瓶,，可供 500 份樣品測試；使用前整盒試劑應(yīng)保存 4 ℃冰箱,，保質(zhì)期 12 個(gè)月,；室溫或常溫保存時(shí)，保質(zhì)期 3~6 個(gè)月,。 
    使用：任何試劑使用時(shí),，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的,，防止變質(zhì),。 
    器具原則：任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽，單獨(dú)使用,，以免交叉污染,。
    試劑只出不入原則：測試時(shí)，從任何試劑瓶吸出的試劑,，禁止再次注射回試劑瓶,。

6 、農(nóng)殘速測試劑盒的特點(diǎn)

（ 1 ）良好的穩(wěn)定性：在 4 ℃條件下可以保存至少一年,，常溫條件下保質(zhì)期可長達(dá) 3 個(gè)月,；
（ 2 ）專業(yè)化的制備技術(shù)：酶試劑調(diào)配成直接取用的液體狀態(tài)，為用戶減少稀釋酶液的麻煩及不確定因素,；
（ 3 ）打破傳統(tǒng)方法所需的苛刻條件的限制：酶試劑可在常溫下直接使用（而無需 37 ℃條件）,，使操作更加簡便快捷，并大大降低檢測設(shè)備的成本,；
（ 4 ）檢測結(jié)果靈敏：zui低檢測限可達(dá) 0.1mg/kg 以下,，對甲胺磷及樂斯本等常見農(nóng)藥的檢測限均低于 0.8mg/kg ，優(yōu)于相關(guān)國家國準(zhǔn)要求,；
（ 5 ）抗干擾性強(qiáng)：對芹菜、辣椒,、韭菜等辛辣樣品同樣可檢測,，不易受其植物次生物質(zhì)的干擾；
（ 6 ）通用性：可以適用于同功能的幾乎所有型號的檢測儀器,；
（ 7 ）樣品處理及檢測過程總時(shí)間不超過 15 min ,，大量檢測時(shí)每均每個(gè)樣品檢測時(shí)間低于 5 min, 大大加快了檢測速度，節(jié)省檢測時(shí)間,。 
和使用方便等特點(diǎn),，適合各農(nóng)藥殘留監(jiān)測部門和檢測站使用。

：李菲 :