研磨的方法和主要注意事項(xiàng),一起來了解下
閱讀:13206 發(fā)布時(shí)間:2021-8-10
液氮研磨儀采用了特殊的垂直上下震動模式,,通過研磨珠(氧化鋯,、鋼珠、玻璃珠,、陶瓷珠)的高頻往復(fù)振動,、撞擊、剪切,,快速的實(shí)現(xiàn)目的,。使研磨的樣品具有更加充分、更均勻,、樣品重復(fù)性更好,、樣品之間沒有交叉污染。
研磨方法:
空缽先用液氮預(yù)冷,,再將研棒的上端用紗布包裹(用力時(shí)手不會痛),,組織建議切成薄片,研磨時(shí)不易濺出,,也更容易磨碎,,研棒建議頂著手心,這樣便于用力,。研磨過程中要避免液氮干涸,,研磨至細(xì)粉即可。待液氮剛蒸發(fā)完時(shí),,用一個(gè)小藥勺取出所需用量進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)或者將組織粉末裝人容器內(nèi),,保存于一70℃的溫度下,以備下一步實(shí)驗(yàn)用,。使用得當(dāng)?shù)囊旱心ソM織法,,將為下一步實(shí)驗(yàn)成功奠定了基礎(chǔ)。值得一提的是,,操作中所有接觸的器皿及耗材須清洗干凈并消毒,。如果研磨組織用于提取RNA時(shí),使用的器皿及耗材必須采用焦碳酸二乙醋(DEPC)滅活RNase并進(jìn)行高壓消毒處理,。
注意事項(xiàng):
1.液態(tài)氮在常壓時(shí)的溫度相當(dāng)?shù)牡?,一旦與物體表面接觸將迅速地沸騰,同時(shí)也會帶走相當(dāng)大量的熱能,。因此,,使用液態(tài)氮時(shí)須額外注意,避免與皮膚的直接接觸,。
2.研缽要用瓷質(zhì)的,,當(dāng)然研杵也一樣,,倒液氮的量要視你研缽的大小和實(shí)驗(yàn)材料的量而定,建議你用小一點(diǎn)的研缽,,這樣研磨的時(shí)候材料比較集中好研一點(diǎn),,液氮倒研缽體積的一半即可。
3.把樣品放入研缽中,,倒入少量液氮,,液氮就會像沸騰了一樣,這時(shí)候迅速研磨,。動作一定不要太大,,最好是用手心的力量往下旋轉(zhuǎn)著碾碎,動作太大會把樣品濺飛,,如果樣品量很少直接就可能磨沒了,。大約幾秒沸騰就結(jié)束,再磨幾下就可以再加入點(diǎn)液氮,,重復(fù)以上過程,,直到認(rèn)為磨得比較細(xì)了為止。