細(xì)胞破碎儀的破碎技術(shù)是怎樣的？

在生物產(chǎn)物的分離提取中,，如果目標(biāo)物質(zhì)為胞外產(chǎn)物（如霉菌產(chǎn)生的糖化酶等）,，其提取過(guò)程較簡(jiǎn)單，只需直接進(jìn)行固液分離,，獲得澄清的濾液,，再進(jìn)行分離純化操作；如果目標(biāo)物質(zhì)為胞內(nèi)產(chǎn)物或多細(xì)胞生物組織中的各種生物分子（如堿性磷酸酶等胞內(nèi)酶,、部分外源基因表達(dá)產(chǎn)業(yè)或植物細(xì)胞產(chǎn)物等）,，都需要事先將細(xì)胞或組織破碎，使目標(biāo)物質(zhì)充分釋放到溶液中而且不失去生物活性,。

不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細(xì)胞破碎的難易程序不一,，使用的方法也不相同,，如動(dòng)物臟器的細(xì)胞膜較脆弱，容易破碎,，植物和微生物由于具有較堅(jiān)固的纖維素,，半纖維素組成的細(xì)胞壁,，要采取專(zhuān)門(mén)的細(xì)胞破碎方法。

細(xì)胞破碎儀的破碎方法

按照是否存在外加作用力,，細(xì)胞破碎儀的破碎方法可分為機(jī)械法和非機(jī)械法兩大類(lèi),。機(jī)械破碎中細(xì)胞所受的機(jī)械作用力主要有壓縮力和剪切力，非機(jī)械破碎主要利用化學(xué)或生化試劑（如酶）改變細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)而釋放胞內(nèi)物質(zhì),。

細(xì)胞破碎儀機(jī)械破碎法

通過(guò)機(jī)械運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的剪切力的作用,，使細(xì)胞破碎的方法稱(chēng)為機(jī)械破碎法。機(jī)械破碎法是工業(yè)規(guī)模細(xì)胞破碎的主要手段,，具有處理量大,，破碎效率高，速度快等特點(diǎn),，適用于植物材料和細(xì)菌細(xì)胞的破碎,。按照所使用的破碎機(jī)械的不同，可以分為搗碎法,，珠磨法,，勻漿法和超聲波破碎法等。

1,，細(xì)胞破碎儀搗碎法,。利用搗碎機(jī)高速旋轉(zhuǎn)葉片鎖產(chǎn)生的剪切力將組織細(xì)胞破碎，是一種較劇烈的破碎細(xì)胞的方法,。通?？上扔眉矣檬称芳庸C(jī)將組織打碎，然后再用10000~20000r/min的內(nèi)刀式組織搗碎機(jī)（即高速分散器）將組織的細(xì)胞打碎,，為了防止發(fā)熱或升溫過(guò)高,，通常是轉(zhuǎn)10~20s，停10~20s,，可反復(fù)多次,。

搗碎法適用于動(dòng)物組織，內(nèi)臟,，植物種子,，嫩菜葉，較柔軟的果蔬等材料的破碎,。但由于旋轉(zhuǎn)刀片的機(jī)械剪切力較大且破碎過(guò)程中溫度易迅速上升,，不適于核酸等生物大分子的提取。

2,，細(xì)胞破碎儀琢磨法,。琢磨是一種常用的機(jī)械破碎細(xì)胞的方法，將玻璃小珠與細(xì)胞懸浮液一起快速攪拌。由于研磨作用,，使細(xì)胞獲得破碎,，常用的工業(yè)設(shè)備是高速珠磨機(jī)。該法適用于絕大多數(shù)微生物細(xì)胞的破碎,。如采用高速濕法珠磨分離純化重組人腫瘤壞死因子時(shí),，菌體經(jīng)間歇式珠磨機(jī)破碎3min，玻璃珠直徑為0.25~0.50mm,，裝珠量為破碎室總體積的85%,，攪拌轉(zhuǎn)速1500r/min，破碎液于4攝氏度,，15000r/min離心15min后去除細(xì)胞碎片,。本條件下，目標(biāo)蛋白回收率可達(dá)90.3%,，活性回收率為85.8%,。

3，細(xì)胞破碎儀高壓勻漿法,。高壓勻漿破碎又稱(chēng)高壓剪切破碎法,。其破碎原理是：細(xì)胞懸浮液在高壓作用下從閥座與閥之間的環(huán)隙高速?lài)姵龊笞矒舻脚鲎箔h(huán)上，細(xì)胞在受到高速撞擊作用后,，急劇釋放到低壓環(huán)境,，從而在撞擊力和剪切力等的綜合作用下破碎。