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        隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人民生活水平的迅速提高，食品安全快速檢測(cè)技術(shù)逐步受到重視,，涌現(xiàn)出了不少新的技術(shù)和產(chǎn)品,，到目前已有五十多種。蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)作為zui早開(kāi)發(fā)的項(xiàng)目,，其技術(shù)和產(chǎn)品也zui為成熟,，成為食品安全檢測(cè)的必檢項(xiàng)目。
        綠洲生化企業(yè)經(jīng)過(guò)二十年的不懈努力,，為我國(guó)農(nóng)殘快速檢測(cè)作出了重要的貢獻(xiàn),。2001年*發(fā)布了蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)方法行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 448-2001），接著衛(wèi)生部又頒布了蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法（GB/T 5009.199-2003）,，這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)都采用了基于昆蟲(chóng)毒理學(xué)之膽堿酯酶抑制原理而建立起來(lái)的酶抑制率法（分光光度法）,，我們不但提供了成熟的技術(shù)和產(chǎn)品，而且積極參與了標(biāo)準(zhǔn)的制定工作,。

一,、檢測(cè)原理
        在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān),。正常條件下，膽堿酯酶（ChE）催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物（碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI）水解,，其水解產(chǎn)物與顯色劑（二硫代二硝基苯甲酸DTNB）發(fā)生反應(yīng),，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)或農(nóng)殘測(cè)試儀在412nm處測(cè)定吸光度的變化值（△A）,，計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在,。
        對(duì)于酶抑制率法來(lái)說(shuō)，膽堿酯酶制劑是zui為關(guān)鍵的因素,，其質(zhì)量技術(shù)水平?jīng)Q定了檢測(cè)的靈敏度,、穩(wěn)定性和可靠性。膽堿酯酶制劑的研發(fā)工作一直是本公司的重點(diǎn),，我們研究了大量的酶源材料,，在提取方法和保持酶活性穩(wěn)定技術(shù)等方面也積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，是目前國(guó)內(nèi)*可以根據(jù)客戶需求,，生產(chǎn)不同靈敏度和活性的液體酶制劑的生產(chǎn)廠家,，產(chǎn)量和質(zhì)量都一直處于國(guó)內(nèi)水平，其中比較有代表性的產(chǎn)品如下：

AB204    農(nóng)殘速測(cè)試劑     按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003配制     500份裝/套
緩 沖 劑        10包         每包加500mL蒸餾水或純凈水溶解           常溫存放
膽堿酯酶        10瓶         不用配制,，直接取用                                    4℃冰箱保存      每份加100μL
顯 色 劑          2瓶          加25mL緩沖液溶解                                     4℃冰箱保存      每份加100μL
底 物                 4瓶          加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解                  4℃冰箱保存      每份加100μL
                                          或者加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解            4℃冰箱保存      每份加20μL
酶 活 力                          空白對(duì)照1分鐘吸光度變化值（ΔΑ0）在0.15-0.3之間,。

使用方法：請(qǐng)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199-2003操作，或根據(jù)農(nóng)藥殘留測(cè)試儀的使用說(shuō)明進(jìn)行測(cè)試。

1,、使用方法
        取2g果蔬樣品（塊莖類取4g）,，葉菜剪成1cm左右見(jiàn)方的碎片，塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,，放入三角瓶中,，加入10mL緩沖液，振蕩1～2min ,，倒出提取液,，靜置2min，待測(cè),。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過(guò)濾后再測(cè),。
2、測(cè)試
        對(duì)照測(cè)試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液,，再分別加入100μL酶液和顯色劑,，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100μL底物,，搖勻并立即倒入比色杯中,，及時(shí)放入儀器的測(cè)量室第1通道，合上蓋,。按鍵,，顯示屏下方延遲10s后，測(cè)量時(shí)間開(kāi)始倒計(jì)時(shí)180s,，計(jì)時(shí)完畢,，顯示屏顯示吸光度增量及抑制率。在進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí),，2～8通道可同時(shí)進(jìn)行樣品測(cè)試,。
        樣品測(cè)試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測(cè)液，再分別加入100μL酶液和顯色劑,，混勻,，靜置反應(yīng)10min后加入100μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中,，及時(shí)放入儀器的測(cè)量室通道,，合上蓋。按鍵,，顯示屏下方延遲10s后,，測(cè)量時(shí)間開(kāi)始倒計(jì)時(shí)180s，計(jì)時(shí)完畢,，顯示屏顯示吸光度增量及抑制率。數(shù)據(jù)自動(dòng)保存,，如有需要按

鍵打印,。
3,、結(jié)果判定
           以分光光度計(jì)測(cè)試（412 nm波長(zhǎng)）時(shí)，按下式計(jì)算抑制率：
                                                                                                               抑制率（%）=[（ΔΑ0－ΔΑt ）/ΔΑ0]×100
          以農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀檢測(cè)時(shí)其抑制率一般可自動(dòng)計(jì)算,。若樣品抑制率≥50%,，表示樣品農(nóng)殘超標(biāo)，為陽(yáng)性結(jié)果,。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測(cè),，多次檢測(cè)仍呈陽(yáng)性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。

二,、檢測(cè)靈敏度
        由于采用的標(biāo)準(zhǔn)方法的不同,，取樣量、檢測(cè)程序和判定標(biāo)準(zhǔn)也有所不同,，如國(guó)標(biāo)法以抑制率≥50%判定為陽(yáng)性,，而*行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)則以抑制率≥70%判定為陽(yáng)性。我們進(jìn)行了大量的對(duì)比實(shí)驗(yàn),，發(fā)現(xiàn)在實(shí)際檢測(cè)中,，兩種方法的zui終檢測(cè)靈敏度還是基本*的。我們用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)農(nóng)殘速測(cè)試劑的zui低檢測(cè)限進(jìn)行了多次測(cè)試,，并通過(guò)了中國(guó)廣州分析測(cè)試中心和*蔬菜水果質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（廣州）等專業(yè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)驗(yàn)證,，結(jié)果如下：

農(nóng)殘速測(cè)試劑對(duì)幾種常見(jiàn)農(nóng)藥的zui低檢測(cè)限（mg/kg）