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1,、試劑配制及保存 
        緩沖劑            6包         每包加510mL蒸餾水或純凈水溶解,常溫存放,。
        顯色劑            3瓶         每瓶加10.5mL緩沖液溶解，4℃冰箱保存,，每份加100μL,。
        底 物               5瓶         每瓶加3.1mL蒸餾水或純凈水溶解，4℃冰箱保存,，每份加100μL,。 
        膽堿酯酶        5瓶         不用配制，直接取用 4℃冰箱保存,，每份加100μL,。
        酶活力          空白對照1分鐘吸光度變化值（ΔΑ₀）在0.15-0.3之間。

2,、樣品提取
       取2g果蔬樣品（塊莖類取4g）剪成1cm左右見方碎片,，放入小燒杯（或取樣瓶）中；加入10mL緩沖液,，振蕩1～2min,，倒出提取液，靜置2min待測,。

3,、測試
       對照測試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液,，再分別加入100μL顯色劑和酶液,，混勻，37℃下放置15min后加入100μL底物,，搖勻并立即倒入比色杯中,，放入測試通道，按儀器“對照”鍵測試3min的吸光度變值ΔΑ0,。
       樣品測試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測樣品液,，再分別加入100μL顯色劑和酶液，混勻,，37℃下放置15min后加入100μL底物,，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測試通道,，按儀器“樣品”鍵,，測試3min的吸光度變化值ΔΑt。
結(jié)果判定： 
       ◇ 以分光光度計(jì)測試時(shí),，按以下表達(dá)式計(jì)算出抑制率：  抑制率（%）=[（ΔΑ₀－ΔΑ_t）/ΔΑ₀]×100
       ◇ 以農(nóng)殘檢測儀檢測時(shí)其抑制率一般可自動計(jì)算,。若樣品抑制率≥50%,，表示被測果蔬農(nóng)殘超標(biāo)，為陽性結(jié)果,。陽性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測,，多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。 
操作提示：
        在加底物的環(huán)節(jié)中,，可預(yù)先將底物加入比色杯,，待靜置時(shí)間一到，馬上將反應(yīng)瓶中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色杯,，并迅速放入測試通道進(jìn)行測試,。這樣可以減少同時(shí)檢測多個樣品時(shí)因加底物時(shí)間過長而造成的誤差。

4,、注意事項(xiàng)
       酶活性要求：本試劑盒中酶試劑正?；钚?Delta;Α0≥0.3，符合GB/T 5009.199-2003方法的要求,。 
       保存：試劑盒應(yīng)保存4℃冰箱,，保質(zhì)期12個月。
       使用：任何試劑使用時(shí),，用一瓶打開一瓶,，用完后才使用新的，防止變質(zhì),。
       器具原則：任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽,，單獨(dú)使用，以免交叉污染,。 
       試劑只出不入原則：測試時(shí),，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶,。 
       環(huán)境溫度對測試的影響：當(dāng)環(huán)境溫度過低時(shí)（一般低于20℃）,測試時(shí)需作必要保溫措施,。
       常溫方法：本試劑可用常溫方法測試，測試時(shí)試劑室溫放置10min,，測試1min的吸光度變化值ΔΑ₀,。正常活性ΔΑ0在0.15~0.3之間,。