食品細(xì)菌快速測(cè)定儀的操作原理和方法因儀器類型而異,,以下是幾種常見(jiàn)類型的操作原理及方法:
一,、操作原理
ATP生物發(fā)光法:
原理:ATP(三磷酸腺苷)是所有生物細(xì)胞中均有的能量分子,測(cè)定出樣品中細(xì)菌細(xì)胞的ATP含量,,即可得知細(xì)菌數(shù),。該儀器利用生化作用使細(xì)菌細(xì)胞的ATP發(fā)光,以其光亮度測(cè)定細(xì)菌量,,同時(shí)用生物方法分離非細(xì)菌細(xì)胞的ATP以避免假陽(yáng)性,,并用化學(xué)手段除去干擾物質(zhì)(如鹽、商業(yè)消毒劑等)的萃滅作用以避免假陰性,。
過(guò)氧化物酶檢測(cè)法:
原理:細(xì)菌,、真菌等好氧微生物在新陳代謝時(shí)產(chǎn)生一種過(guò)氧化物酶,儀器檢測(cè)的就是過(guò)氧化物酶,。過(guò)氧化物酶的產(chǎn)生與生物活性的高低成一定比例,,因此樣品中現(xiàn)存的酶的數(shù)量可以反映當(dāng)前總的生物活性。
二,、操作方法
ATP生物發(fā)光法測(cè)定儀:
準(zhǔn)備階段:打開機(jī)器,,點(diǎn)擊檢測(cè),儀器提示“放入拭子”進(jìn)入檢測(cè)界面,。從冰箱中取出拭子,,放置10-15分鐘,待恢復(fù)至室溫后使用,。
采樣階段:從套管里取出拭子,,一手捏住連接頭,擦拭物體表面(如45°傾斜,,10×10cm表面),。將采集器插回套管。
處理階段:一手捏住連接頭,,一手捏住囊體上部,,來(lái)回彎折,直至折斷閥門,。擠壓拭子頭3次(或輕甩5下拭子),,使拭子頭中的液體全部被擠出。
檢測(cè)階段:立即將拭子插入儀器中檢測(cè),,點(diǎn)擊檢測(cè)按鈕,,15秒后出檢測(cè)結(jié)果。
基于過(guò)氧化物酶檢測(cè)的儀器(如HMBX儀器):
液體樣品:取1支空的測(cè)試管,,移去皮塞,,向內(nèi)面加10滴50C試劑,然后用注射器取10ml的樣品加入試管中,。加10滴50R試劑于試管中,,用皮塞蓋好反應(yīng)管,,用排風(fēng)裝置刺破皮塞排2-3次后移去,搖擺試管混合試劑,,等15分鐘左右,,再搖擺試管。打開儀器開關(guān)“ON”,,3-4秒后顯示“00.00”,,輕彈反應(yīng)管使管壁上的液體流下,插入反應(yīng)管,,用探針開始測(cè)量,,讀數(shù)BRM,使用“mode”讀出CFU,。
固體樣品:取1g樣品加入到預(yù)先裝入試劑的試管中,,后續(xù)步驟與液體樣品相同。