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PCR儀分類
根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為普通PCR儀,,梯度PCR儀,,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類:
1.普通的PCR儀:
把一次PCR擴(kuò)增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,,叫傳統(tǒng)的PCR儀,,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行,。主要是做簡單的,,對目的基因退火溫度的擴(kuò)增,。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),,醫(yī)學(xué)臨床,,檢驗檢疫等機構(gòu)。
2.原位PCR儀
用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,,如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等,。是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,,不但可以檢測到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置,,于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值,。
3.梯度PCR儀:
把一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件,通常12鐘溫度梯度,,這樣的儀器就叫梯度PCR儀,。因為被擴(kuò)增的不同DNA片段,其zui適退火溫度不同,,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表大量高的zui適退火溫度,,進(jìn)行有效的擴(kuò)增,。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間,。主要用于科研,,教學(xué)機構(gòu)。梯度PCR儀,,在不設(shè)置徒弟的情況下也可以做普通PCR擴(kuò)增,。
4.實時熒光定量PCR儀:
在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀,。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,,只是PCR擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增,。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集型號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀,。熒光定量PCR儀有單通道,,雙通道,和多通道,。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候,,選用單通道,有多熒光標(biāo)記的時候用多通道,。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物,,因為一次只能檢測一種目的基因的擴(kuò)增量,需多次擴(kuò)增才能檢測完不同的目的基因片段的量,。該儀器主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測,,生物醫(yī)藥研發(fā),食品行業(yè),,科研院校等機構(gòu),。
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