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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司資料大小
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799次上海研域網(wǎng)絡(luò)有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標(biāo)試劑盒,細胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,,提供免費代測服務(wù),,保證實驗結(jié)果客觀真實性。
人腫瘤壞死因子受體2ELISA檢測試劑盒
試驗原理:
TNF-R2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知TNF-R2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測,。先將TNF-R2和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中TNF-R2的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
蒸餾水,。
加樣器:5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200ul、500ul,、1000ul,。
振蕩器及磁力攪拌器等。
人腫瘤壞死因子受體2ELISA檢測試劑盒
安全性
避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
操作注意事項
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
人腫瘤壞死因子受體2ELISA檢測試劑盒
樣品收集,、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人腫瘤壞死因子受體2ELISA檢測試劑盒
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。
局限
6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果,。
人腫瘤壞死因子受體2ELISA檢測試劑盒
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1,、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),,相應(yīng)的TNF-R2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,,樣品的TNF-R2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。
3、檢測值范圍:0-8.0ng/ml
4,、敏感度: 0.01 ng/ml
c-erbB2(HER2 receptor) 抗HER2受體抗體 0.2ml
HER2 receptor(erbB-2 isoform 2) 抗c-erbB-2受體抗體 0.2ml
rec Protein A/RBITC 羅丹明標(biāo)記重組純化蛋白A 0.3ml
Bovine IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記牛IgG 0.3ml
HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptorN-Terminus) 抗c-erbB-2受體抗體(N端) 0.2ml
HGF(hepatocyte growth factor) 肝細胞生長因子抗體 0.1ml
HGF(hepatocyte growth factor) 肝細胞生長因子抗體 0.2ml
HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病毒抗體 0.2ml
HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8) 人類皰疹病毒8抗體 0.1ml
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