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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司資料大小
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891次上海研域網(wǎng)絡(luò)有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標(biāo)試劑盒,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,,提供免費(fèi)代測服務(wù),,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性,。
人甲肝病毒抗體IgGELISA檢測試劑盒
試驗(yàn)原理:
HAV-IgG試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知HAV-IgG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測,。先將HAV-IgG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,、B,,和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HAV-IgG的濃度呈比例關(guān)系,。
自備材料
蒸餾水,。
加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等,。
人甲肝病毒抗體IgGELISA檢測試劑盒
安全性
避免直接接觸終止液和底物A,、B。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
人甲肝病毒抗體IgGELISA檢測試劑盒
樣品收集,、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人甲肝病毒抗體IgGELISA檢測試劑盒
操作步驟
使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。
局限
6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
人甲肝病毒抗體IgGELISA檢測試劑盒
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),,相應(yīng)的HAV-IgG標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,,樣品的HAV-IgG含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。
3、檢測值范圍:0-40IU/L
4,、敏感度: 0.1 IU/LTNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體 0.2ml
TNFSF14/LIGHT/CD258 腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體 0.2ml
TP53(tumor protein p53; Li-Fraumeni syndrome) 抗腫瘤P53抗體 0.2ml
TNFSF18/GITR Ligand(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18) 腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體 0.2ml
HVEM/TNFRSF14(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14) 腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體 0.2ml
*mt(Topoisomerase (DNA) I, mitochondrial) 線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 0.1ml
Rabbit HRP/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗HRP 0.1ml
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