上海研域網(wǎng)絡(luò)有限公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標(biāo)試劑盒,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測(cè)試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清，提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀(guān)真實(shí)性,。我公司對(duì)試劑盒質(zhì)量100%保證,，若存在質(zhì)量問(wèn)題,，我們無(wú)條件包退換,。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,，請(qǐng)：王： ，

人單純皰疹病毒1型抗體IgM的試驗(yàn)步驟及結(jié)果

試驗(yàn)原理：
　　　　HSV1-IgM試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HSV1-IgM濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將HSV1-IgM和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后,，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A、B,，和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中HSV1-IgM的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料
蒸餾水,。
加樣器：5ul,、10ul,、50ul,、100ul,、200ul,、500ul,、1000ul,。
振蕩器及磁力攪拌器等,。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗,。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

人單純皰疹病毒1型抗體IgM的試驗(yàn)步驟及結(jié)果

操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,，取上清液
保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人單純皰疹病毒1型抗體IgM的試驗(yàn)步驟及結(jié)果

操作步驟
使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時(shí),。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿(mǎn)洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿(mǎn)洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入底物A,、B各50ul，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照。
取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線(xiàn)性,。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。

人單純皰疹病毒1型抗體IgM的試驗(yàn)步驟及結(jié)果

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1,、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的HSV1-IgM標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X）,，做得相應(yīng)的曲線(xiàn)，樣品的HSV1-IgM含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度,。
3,、檢測(cè)值范圍：0-40IU/L
4、敏感度： 0.1 IU/LHLA-DR （human leukoyte Antigen DR） HLA-DR抗原抗體 0.2ml
HLA-G （Human Leukocyte gen-G） 人類(lèi)白細(xì)胞抗原G/組織相容性白細(xì)胞抗原G抗體 0.2ml
HLA-E （Human Leukocyte gen-E） 人類(lèi)白細(xì)胞抗原E 0.2ml
Goat human Fibrinogen/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗人纖維蛋白原 0.3ml
phospho-14-3-3 （Ser58）  磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 0.1ml
phospho-4EBP1（Ser64）  磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
HMGA1 （high mobility group AT-hook 1） 高遷移率族蛋白A1抗體 0.2ml
HMGA2 （high mobility group A2） 高遷移率族蛋白A2抗體 0.2ml