人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA檢測試劑盒

試驗原理：
　　　　MLCK試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知MLCK濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測,。先將MLCK和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后，加入親和素標記過的HRP,。再經過溫育和洗滌,，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A,、B,，和酶結合物同時作用。產生顏色,。顏色的深淺和樣品中MLCK的濃度呈比例關系,。　　　

自備材料
蒸餾水,。
加樣器：5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200ul、500ul,、1000ul,。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗,。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,，使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存,。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質,。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標板時應充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應一致,，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液
保存------如果樣品不立即使用,，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA檢測試劑盒

操作步驟
使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產生加樣上的誤差,。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內,。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次,。
每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數增加一次,。
每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
取出酶標板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果,。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990,。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應,。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%,。

人肌球蛋白輕鏈激酶ELISA檢測試劑盒

結 果 判 斷 與 分 析
1,、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y）,，相應的MLCK標準品濃度為橫坐標（X）,，做得相應的曲線，樣品的MLCK含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,。

3,、檢測值范圍：0-400umol/L

4、敏感度： 1.0 umol/L1-Fluoronaphthalene 1-氟萘 [321-38-0] 100g
5-Fluoroorotic acid 5-氟乳清酸 [703-95-7] 1g
5-Fluoroorotic acid 5-氟乳清酸 [703-95-7] 5g
4-Fluorotoluene 對氟甲苯 [352-32-9] 250ml
5-Fluorouracil 5-氟尿嘧啶 [51-21-8] 5g
5-Fluorouracil 5-氟尿嘧啶 [51-21-8] 1g
Fluridone 氟啶酮 [59756-60-4] 100mg
Foam-free powder 消泡劑 / 25g
Foam-free powder 消泡劑 / 100g
Foam-free powder 有機硅消泡劑 / 1kg
Folic acid 葉酸 [59-30-3] 25g
Folic acid 葉酸 [59-30-3] 100g
Glass wool 玻璃纖維 / 250g
Glipizide 格列吡嗪 [29094-61-9] 25g
Glipizide 格列吡嗪 [29094-61-9] 100g
Folin-Ciocalteu’s phenol reagent 福林酚 / 100ml
Forchlorfenuron 氯吡苯脲 [68157-60-8] 5g
Forchlorfenuron 氯吡苯脲 [68157-60-8] 25g
Formaldehyde（37-40%） solution 甲醛溶液 [50-00-0] 500ml
Formaldehyde 10% solution 10%甲醛溶液 [50-00-0] 1L
Formaldehyde sodium sulfoxylate 甲醛合次硫酸氫鈉 [6035-47-8] 500g
Formamide 甲酰胺 / 500ml
Formamide 甲酰胺 / 100ml
Formamide 甲酰胺 / 500ml
Formamide deionized 去離子甲酰胺 [75-12-7] 100ml
Formamide deionized 去離子甲酰胺 [75-12-7] 500ml
Formamide deionized 去離子甲酰胺 [75-12-7] 50ml
Formamide deionized 去離子甲酰胺 [75-12-7] 250ml
Formamide 甲酰胺 [75-12-7] 250ml