人晚期糖基化終末產(chǎn)物ELISA檢測試劑盒　　　　　　　　　　　　

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

試驗原理：
　　　　AGEs試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知AGEs濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將AGEs和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中AGEs的濃度呈比例關(guān)系,。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人晚期糖基化終末產(chǎn)物ELISA檢測試劑盒　

操作注意事項
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存,。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。

樣品收集,、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

人晚期糖基化終末產(chǎn)物ELISA檢測試劑盒　

操作步驟
使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。

人晚期糖基化終末產(chǎn)物ELISA檢測試劑盒　

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的AGEs標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X）,，做得相應(yīng)的曲線，樣品的AGEs含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。

3,、檢測值范圍：0-800ng/ml

4、敏感度： 1.0 ng/ml

ICAD/DFF-45β（Inhibitor of Caspase-Activated Dnase ） Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 0.2ml
Icos/CD278（Inducible T-cell costimulator） 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體 0.2ml
IDE（Insulin degradation enzyme） 胰島素降解酶抗體 0.1ml
Rabbit anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔抗羊IgG 0.3ml
Rabbit IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔IgG（細胞流式同型對照） 0.3ml
IDE（Insulin degradation enzyme） 胰島素降解酶抗體 0.2ml
IDE（Insulin degradation enzyme） 胰島素降解酶抗體 0.2ml
IFABP（Intestinal Fatty acid binding protein） 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
IFI16/p16（Interferon inducible protein 16） γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體 0.2ml
IFITM1 （interferon induced transmembrane protein 1） 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 0.2ml
human IFN-β （Interferon β） 干擾素-β抗體（抗人） 0.1ml
human IFN-β （Interferon β） 干擾素-β抗體（抗人） 0.2ml
Goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊IgG（細胞流式同型對照） 0.3ml
Rat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記大鼠IgG（細胞流式同型對照） 0.3ml
Rabbit anti-chicken IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔抗雞IgG 0.3ml
Rabbit anti-Guinea IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔抗豚鼠IgG 0.3ml
Goat anti-bovine IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗牛IgG 0.3ml
human IFN-α （Interferon α ） 干擾素-α抗體（抗人） 0.1ml
human IFN-α （Interferon α ） 干擾素-α抗體（抗人） 0.2ml
IFN-α2b（Interferon alpha 2b） 干擾素α2b抗體 0.2ml
IFN-β （Interferon β） 干擾素-β抗體（大鼠,、小鼠） 0.1ml
IFN-β （Interferon β） 干擾素-β抗體（大鼠,、小鼠） 0.2ml
IFN-gamma（Interferon gamma ）（human） 干擾素-γ抗體（抗人） 0.1ml
Goat anti-chi IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗雞IgG 0.3ml
Goat anti-chi IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗雞IgM 0.3ml
Rb FITC/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔抗FITC 0.3ml
Goat anti-human IgA/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗人IgA 0.3ml
Goat anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗人IgM 0.3ml
IFN-gamma（Interferon gamma ）（human） 干擾素-γ抗體（抗人） 0.2ml
IFN gamma（Interferon gamma）（mouse,rat） 干擾素-γ抗體 （抗大、小鼠） 0.1ml
IFN gamma（Interferon gamma）（mouse,rat） 干擾素-γ抗體 （抗大,、小鼠） 0.2ml
IFN-γR/CD119（Interferon-γR receptor） 干擾素-γ受體抗體 0.2ml
nti-IGC （immunoglobulin delta heavy chain constant A region membrane-bound form） 兔抗非洲爪蟾IGC抗體 0.2ml
IGF-1R/CD221 （Insulin-like Growth Factor-I Receptor） 胰島素樣生長因子-I受體抗體 0.1ml
Goat anti-rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗大鼠IgM 0.3ml
Goat anti-Guinea IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗豚鼠IgG 0.3ml
Mouse anti-goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記小鼠抗羊IgG 0.3ml
Mouse anti-goat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記小鼠抗羊IgM 0.3ml
IGF-1R/CD221 （Insulin-like Growth Factor-I Receptor） 胰島素樣生長因子-I受體抗體 0.2ml
IGFBP-1（Insulin-like Growth Factor Binding Protein 1） 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml
IGFBP-2 （Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2） 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體 0.2ml
IGFBP-3 （Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3） 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3抗體 0.1ml
IGFBP-3 （Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3） 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4抗體 0.2ml
IGFBP-4/IBP4 （ Insulin-like Growth Factor Binding Protein 4） 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4抗體 0.2ml
Rabbit anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗大鼠IgG（10nm/15nm） 0.5ml
IGFBP-5/IBP5 （ Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5） 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體 0.2ml
IGF-I（Insulin-like Growth Factor-I） 胰島素樣生長因子-I抗體 0.1ml
IGF-I（Insulin-like Growth Factor-I） 胰島素樣生長因子-I抗體 0.2ml
IGF-II（ Insulin-like Growth Factor-II ） 胰島素樣生長因子-II抗體 0.1ml
IGF-II（ Insulin-like Growth Factor-II ） 胰島素樣生長因子-II抗體 0.2ml
IGF-IIBP3（Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3） 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
Rabbit anti-Goat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗羊IgG（10nm/15nm） 1ml
Rabbit anti-Goat IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗羊IgM（10nm/15nm） 2ml
Rabbit anti-Guinea IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgG （10nm/15nm） 0.5ml
Rabbit anti-Guinea IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgG （10nm/15nm） 1ml
Rabbit anti-Guinea IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM （10nm/15nm） 2ml
IGSF8/CD316（Immunoglobulin superfamily member 8） 免疫球蛋超家族成員8抗體 0.2ml
IKB beta （Inhibitor of KB β ） KB抑制蛋白β抗體 0.2ml
IKB α （Inhibitor of KBα） KB抑制蛋白α抗體 0.1ml
IKB α （Inhibitor of KBα） KB抑制蛋白α抗體 0.2ml
p-IKB alpha（phospho S32 + S36）（NF kappa B inhibitor alpha） 磷酸化KB抑制蛋白α抗體 0.2ml
IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 0.2ml
IL-9（Interleukin-9） 白介素9抗體 0.2ml