代測(cè)人結(jié)核菌糖脂抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒

用 途：
　　　　人TBGL-Ab ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿、組織,、緩沖液中細(xì)胞上清液及各種體液中的TBGL-Ab ,。本試劑盒可以檢測(cè)天然和重組的TBGL-Ab 。本試劑盒于科研,、而非用于臨床診斷,。
　　　　
試驗(yàn)原理：
　　　　人TBGL-Ab 試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知TBGL-Ab 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將TBGL-Ab 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A,、B,，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中TBGL-Ab 的濃度呈比例關(guān)系,。
　
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

代測(cè)人結(jié)核菌糖脂抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒

操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存,。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

代測(cè)人結(jié)核菌糖脂抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí),。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。

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結(jié)果分析
以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的TBGL-Ab 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線,，樣品的TBGL-Ab 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。

局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果,。

試劑盒性能
靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。

Goat anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗人IgM 0.3ml
IFN-gamma（Interferon gamma ）（human） 干擾素-γ抗體（抗人） 0.2ml
IFN gamma（Interferon gamma）（mouse,rat） 干擾素-γ抗體 （抗大,、小鼠） 0.1ml
IFN gamma（Interferon gamma）（mouse,rat） 干擾素-γ抗體 （抗大、小鼠） 0.2ml
IFN-γR/CD119（Interferon-γR receptor） 干擾素-γ受體抗體 0.2ml
nti-IGC （immunoglobulin delta heavy chain constant A region membrane-bound form） 兔抗非洲爪蟾IGC抗體 0.2ml
IGF-1R/CD221 （Insulin-like Growth Factor-I Receptor） 胰島素樣生長(zhǎng)因子-I受體抗體 0.1ml
Goat anti-rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗大鼠IgM 0.3ml
Goat anti-Guinea IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記羊抗豚鼠IgG 0.3ml
Mouse anti-goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記小鼠抗羊IgG 0.3ml
Mouse anti-goat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記小鼠抗羊IgM 0.3ml
IGF-1R/CD221 （Insulin-like Growth Factor-I Receptor） 胰島素樣生長(zhǎng)因子-I受體抗體 0.2ml
IGFBP-1（Insulin-like Growth Factor Binding Protein 1） 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1抗體 0.2ml
IGFBP-2 （Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2） 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2抗體 0.2ml
IGFBP-3 （Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3） 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3抗體 0.1ml
IGFBP-3 （Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3） 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4抗體 0.2ml
IGFBP-4/IBP4 （ Insulin-like Growth Factor Binding Protein 4） 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4抗體 0.2ml
Rabbit anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗大鼠IgG（10nm/15nm） 0.5ml
IGFBP-5/IBP5 （ Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5） 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-5抗體 0.2ml
IGF-I（Insulin-like Growth Factor-I） 胰島素樣生長(zhǎng)因子-I抗體 0.1ml
IGF-I（Insulin-like Growth Factor-I） 胰島素樣生長(zhǎng)因子-I抗體 0.2ml
IGF-II（ Insulin-like Growth Factor-II ） 胰島素樣生長(zhǎng)因子-II抗體 0.1ml
IGF-II（ Insulin-like Growth Factor-II ） 胰島素樣生長(zhǎng)因子-II抗體 0.2ml
IGF-IIBP3（Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3） 胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
Rabbit anti-Goat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗羊IgG（10nm/15nm） 1ml