人白細(xì)胞介素-21ELISA 檢測試劑盒　　　　　　　　　　　　

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

試驗原理：
　　　　IL-21試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-21濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測,。先將IL-21和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,，加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中IL-21的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料
蒸餾水,。
加樣器：5ul,、10ul、50ul,、100ul,、200、500ul,、1000ul,。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗,。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

人白細(xì)胞介素-21ELISA 檢測試劑盒　

操作注意事項
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

人白細(xì)胞介素-21ELISA 檢測試劑盒　

操作步驟
使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果,。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。

人白細(xì)胞介素-21ELISA 檢測試劑盒　

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1,、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,，相應(yīng)的IL-21標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X）,，做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-21含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,。

3,、檢測值范圍：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml

Vitamin B1 維生素B1 [67-03-8] 50g
Vitamin B12 維生素12 [68-19-9] 1g
Vitamin D2 維生素D2 [50-14-6] 5g
Vitamin D3 維生素D3 [67-97-0] 1g
Vitamin D3 維生素D3 [67-97-0] 5g
Vitamin E acetate 維生素E乙酯 [7695-91-2] 5g
Vitamin K3 維生素K3 [58-27-5] 100g
Vitexin 牡荊素 [3681-93-4] 20mg
Withaferin A from leaves of Withania somnifera 醉茄素A, [5119-48-2] 5mg
Wood’s metal 伍德合金 [76093-98-6] 100g
Wool fat 羊毛脂 [8006-54-0] 500g
Wortmannin from Talaromyces （Penicillium） wortmannii 渥曼青霉素. KY 12420 [19545-26-7] 5mg
Xanthine 黃嘌呤 [69-89-6] 5g
Xanthine Oxidase From Butter milk 黃嘌呤氧化酶. [9002-17-9] 60U
Xanthine Oxidase From Butter milk 黃嘌呤氧化酶. [9002-17-9] 300U
X-Gal 5-溴-4-氯-3吲哚基-D半乳糖苷 [7240-90-6] 100mg
X-Gal 5-溴-4-氯-3吲哚基-D半乳糖苷 [7240-90-6] 1g
X-Gal 5-溴-4-氯-3吲哚基-D半乳糖苷 [7240-90-6] 5g
X-Gal 5-溴-4-氯-3吲哚基-D半乳糖苷 [7240-90-6] 100mg
X-Gal 5-溴-4-氯-3吲哚基-D半乳糖苷 [7240-90-6] 1g
X-GLUC 5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽 [114162-64-0] 25mg
X-GLUC 5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽 [114162-64-0] 100mg
X-Galactosamidide 5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷 [129572-48-1] 100mg
XTT, sodium salt XTT 鈉鹽 [111072-31-2] 250mg
Xylazine 甲苯噻嗪 [7361-61-7] 5g
o-Xylene 1,2-二甲苯 [95-47-6] 500ml
Zinc sulfide 硫化鋅 [1314-98-3] 100g
Zincon 鋅試劑 [56484-13-0] 25g
Cibacron blue 3G-A 汽巴藍(lán) [84166-13-2] 25g
m-Xylene 1,3-二甲苯 [108-38-3] 500ml
p-Xylene 1,4-二甲苯 [106-42-3] 500ml
Xylene cyanol FF 二甲苯青 FF [2650-17-1] 5g
Xylene cyanol FF 二甲苯青 FF [2650-17-1] 5g
Xylenol blue 二甲苯酚藍(lán) [125-31-5] 10g
Xylenol orange 二甲酚橙 [3618-43-7] 10g
Xylitol 木糖醇 [87-99-0] 100g
D（+）-Xylose D（+）-木糖 [58-86-6] 100g
Zearalenone from Giberella zeae 玉米烯酮 [17924-92-4] 25mg
Zeatin 玉米素 [13114-27-7] 100mg
trans-Zeatin 反玉米素 [1637-39-4] 100mg
trans-Zeatin riboside 反式-玉米素核苷 [6025-53-2] 100mg
Zeaxanthin from Penicillium simplicissimum 玉米黃質(zhì) [144-68-3] 1mg