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研域(上海)化學試劑有限公司

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豬CTL細胞CTL酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

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豬CTL細胞(CTL)酶聯免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍: 
96T1.0 IU/L -24 IU/L
使用目的:
本試劑盒用于測定豬血清,、血漿及相關液體樣本中 CTL細胞(CTL)含量,。

實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬CTL細胞(CTL),。用純化的豬 CTL細胞(CTL)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入 CTL細胞(CTL),再與 HRP標記的CTL細胞(CTL)抗體,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經過*。用純化的豬 CTL細洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成,。顏色的深淺和樣品中的CTL細胞(CTL)呈正相關。用酶標儀在  450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品中豬  CTL細胞(CTL)濃度,。
試劑盒組成

標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因   NaN3抑制辣根過 (HRP)活性。
豬CTL細胞(CTL)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟
1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,,然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后 37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將 30倍濃   30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜30秒后棄去,如此重復 5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同 3,。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液    50µl,,終止反應(此時藍色立轉),。
11.測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行,。
操作程序總:


計算
以標準物的濃度為橫坐標,, OD值為縱坐標,在坐標紙上,,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的 OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,,即為樣品的實際濃度,。
豬CTL細胞(CTL)酶聯免疫分析試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,,洗滌時不影響,。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在 5分鐘內,如標本數量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔,。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值大于標準品孔di一孔的 OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗.
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月

 

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