雞骨鈣素(BGP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

使用說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍：96T
20 ng/L -500 ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測雞血清、血漿及相關液體樣本中骨鈣素(BGP)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞骨鈣素 (BGP)。用純化的雞骨鈣素(BGP)抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入骨鈣素  (BGP),，再與  HRP標記的骨鈣素 (BGP)抗體    ,，形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在 HRP  酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的骨鈣素(BGP)呈正相關,。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中雞骨鈣素(BGP)濃度。
雞骨鈣素(BGP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成

標本要
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因   NaN3抑制辣根過（HRP）活性,。
操作步驟
1.  標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測樣品 10µl（樣品終稀釋度為 5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。3.溫育：用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。30倍稀釋后備用
4.配液：將 30倍濃
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜30秒后棄去,，如此
重復 5次,，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50µl,，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5,。9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液    50µl,，終止反應（此時藍色立轉）。
11.測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。

雞骨鈣素(BGP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總：

計算
以標準物的濃度為橫坐標,， OD值為縱坐標,，在坐標紙上，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。

雞骨鈣素(BGP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有析出,，稀釋時可在浴中加溫助溶，洗滌時不影響,。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間hao控制在 5分鐘內,，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
4．請每次測定的同時做標準曲線,，hao做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本  OD值大于標準品孔第yi孔的 OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉
6．底物請避光保存,。,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期：6個月