培養(yǎng)基制備原則和要求

（一）培養(yǎng)基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學藥品必須純凈,，稱取的份量務(wù)必準確,。
（二）培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準確測定調(diào)節(jié)pH值,。多數(shù)細菌生長的適宜pH值為7.2～7.6,，呈弱堿性。
（三）培養(yǎng)基的滅菌時間和溫度,，應(yīng)按照各種培養(yǎng)基的規(guī)定進行,，以保證滅菌效果及不損失培養(yǎng)基的必需營養(yǎng)成分。培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,，必須置37℃溫箱中培養(yǎng)24小時,，無菌生長者方可應(yīng)用。

（四）所用器皿須潔凈,，忌用鐵或鋼質(zhì)器皿,，要求沒有抑制細菌生長的物質(zhì)存在。
（五）制成的培養(yǎng)基應(yīng)該是透明的,，以便觀察細菌生長性狀以及其他代謝活動所產(chǎn)生的變化,。
二、培養(yǎng)基制備過程
不同的培養(yǎng)基其制備方法也不同,，一般包括以下步驟：
（一）準確稱量試劑 根據(jù)不同的菌類和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
（二）校正pH值 將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標記劃線，加熱溶解,，補充水分,，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N
NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
（三）過濾 將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。
（四）分裝 將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌。
（五）滅菌
培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好,。

高壓蒸汽滅菌,，一般采用15磅／平方（即1.05kg／cm2）壓力，此時的溫度是121.3℃,。滅菌20～30分鐘后,，可達到*滅菌的目的。在進行滅菌的時候,，首先要把滅菌鍋內(nèi)的冷空氣排出,，否則，冷空氣存在會降低鍋內(nèi)的實際溫度,，影響滅菌效果,。