膠體金是一種常用的標(biāo)記技術(shù),，是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)，有其*的優(yōu)點(diǎn),。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用,。在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標(biāo)記。同時(shí)在流式,、電鏡,、免疫、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能例用到,。 　　1971年Faulk 和Taytor將膠體金引入免疫化學(xué),，此后免疫膠體金技術(shù)作為一種新的免疫學(xué)方法，在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域得到了日益廣泛的應(yīng)用,。目前在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用主要是免疫層析法（immunochromatogra-phy）和快速免疫金滲濾法（Dot-immuogold filtration assay DIGFA）,，用于檢測(cè) HBsAg、HCG 和抗雙鏈ＤＮＡ抗體等,，具有簡(jiǎn)單,、快速、準(zhǔn)確和無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn),。 　　免疫膠體金技術(shù)的基本原理： 　　膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷,、抗壞血酸、枸櫞酸鈉,、鞣酸等作用下,，可聚合成一定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),，形成帶負(fù)電的疏水膠溶液,，由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),，故稱膠體金。膠體金在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷,，可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合,，由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性,。 　　膠體金除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外,，還可以與許多其它生物大分子結(jié)合，如SPA,、PHA,、ConA等。根據(jù)膠體金的一些物理性狀,，如高電子密度,、顆粒大小、形狀及顏色反應(yīng),，加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)特性,，因而使膠體金廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)、組織學(xué),、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域,。 　　膠體金標(biāo)記，實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過(guò)程,。吸附機(jī)理可能是膠體金顆粒表面負(fù)電荷,，與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑,、也就是不同顏色的膠體金顆粒,。這種球形的粒子對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能，可以與葡萄球菌Ａ蛋白,、免疫球蛋白,、毒素、糖蛋白,、酶,、抗生素、激素,、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價(jià)結(jié)合,，因而在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)中成為非常有用的工具。 　　免疫金標(biāo)記技術(shù)（Immunogold labelling techique） 主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見(jiàn)黑褐色顆粒,，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),，肉眼可見(jiàn)紅色或粉紅色斑點(diǎn)，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)方法中，這一反應(yīng)也可以通過(guò)銀顆粒的沉積被放大,，稱之為免疫金銀染色,。 　　常用的免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)： 　　（1）免疫膠體金光鏡染色法 　　細(xì)胞懸液涂片或組織切片,，可用膠體金標(biāo)記的抗體進(jìn)行染色,，也可在膠體金標(biāo)記的基礎(chǔ)上，以銀顯影液增強(qiáng)標(biāo)記,，使被還原的銀原子沉積于已標(biāo)記的金顆粒表面,，可明顯增強(qiáng)膠體金標(biāo)記的敏感性。 　?。?）免疫膠體金電鏡染色法 　　可用膠體金標(biāo)記的抗體或抗抗體與負(fù)染病毒樣本或組織超薄切片結(jié)合,，然后進(jìn)行負(fù)染?？捎糜诓《拘螒B(tài)的觀察和病毒檢測(cè),。 　　斑點(diǎn)免疫金滲濾法 　　（3）應(yīng)用微孔濾膜（如膜）作載體,，先將抗原或抗體點(diǎn)于膜上,，封閉后加待檢樣本，洗滌后用膠體金標(biāo)記的抗體檢測(cè)相應(yīng)的抗原或抗體,。 　?。?）膠體金免疫層析法 　　將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標(biāo)記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結(jié)合墊上,，當(dāng)待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后,，通過(guò)毛細(xì)作用向前移動(dòng)，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng),，再移動(dòng)至固定的抗原或抗體的區(qū)域時(shí),，待檢物與金標(biāo)試劑的結(jié)合物又與之發(fā)生特異性結(jié)合而被截留，聚集在檢測(cè)帶上,，可通過(guò)肉眼觀察到顯色結(jié)果,。該法現(xiàn)已發(fā)展成為診斷試紙條，使用十分方便,。 　　快速金標(biāo)試劑技術(shù)是將特異的抗體先固定于酸類纖維素膜的某一區(qū)帶,，當(dāng)該干燥的酸類纖維素一端浸入樣品（尿液或血清）后，由于毛細(xì)管作用,，樣品將沿著該膜向前移動(dòng),，當(dāng)移動(dòng)至固定有抗體的區(qū)域時(shí)，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結(jié)合,。同時(shí)利用金粒具有高電子密度的特性,，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,。當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)，肉眼可見(jiàn)紅色的斑點(diǎn),。既為快速的金標(biāo)檢測(cè)方法原理,。生產(chǎn)快速而試劑，要點(diǎn)在于所采用的單克隆抗體,、多元克隆抗體,、抗原、半抗原,、蛋白嵌合物及膠體金等原料的靈敏性及特異性等是否能達(dá)到zui高的標(biāo)準(zhǔn),，此為金標(biāo)試劑的質(zhì)量之zui重要的標(biāo)準(zhǔn)。