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三維細(xì)胞培養(yǎng)的新進(jìn)展

時(shí)間:2010/4/28閱讀:1587
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傳統(tǒng)的二維細(xì)胞培養(yǎng)并不是細(xì)胞生長的天然狀態(tài),,因而細(xì)胞的基因表達(dá),、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和形態(tài)學(xué)都可能與天然有異,。為了避免這些影響,研究人員一直在利用蛋白凝膠和生物反應(yīng)器來開發(fā)三維的細(xì)胞培養(yǎng)基技術(shù),。zui近,,美國萊斯大學(xué)和德克薩斯大學(xué)M.D. Anderson癌癥中心的研究人員闡明了一種更為簡單的三維培養(yǎng)技術(shù),

研究小組開發(fā)出一種生物裝配器(bioassembler),。這個(gè)系統(tǒng)使用磁力讓細(xì)胞懸浮,,并促使細(xì)胞生長成三維的形狀。懸浮過程是基于一種生物無機(jī)的水凝膠(hydrogel),,這種水凝膠由三部分組成:噬菌體,、磁性氧化鐵和金納米顆粒。研究小組使用的噬菌體是M13來源的,,展示了RGD-4C配體肽段,,以靶定金納米顆粒和磁性氧化鐵。這種基于磁性環(huán)的技術(shù)與所有標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)技術(shù)兼容,,因此可推廣到大部分實(shí)驗(yàn)室,。

為了構(gòu)建培養(yǎng)系統(tǒng),研究人員在包含細(xì)胞的水凝膠中加入了納米顆粒和噬菌體,。由于噬菌體上表達(dá)了配體肽段,,它就能靶定納米顆粒。當(dāng)噬菌體感染細(xì)胞,,也就將納米顆粒運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)。研究人員隨后洗掉凝膠,,在充滿基質(zhì)的Petri dish中接種含有納米顆粒的細(xì)胞,。一旦細(xì)胞裝有納米顆粒,它們就會(huì)對(duì)磁力有反應(yīng),,研究人員在Petri dish的頂部安裝磁力環(huán),。

為了評(píng)估這種技術(shù)下的細(xì)胞生長,研究人員在8天的時(shí)間內(nèi)肉眼觀察并定量監(jiān)測了人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的形成率,、大小和存活率,。他們利用紅色熒光蛋白來監(jiān)測細(xì)胞。

24小時(shí)后,,多細(xì)胞聚集物開始懸浮在液體中,。在接下來的72小時(shí)到192小時(shí),橢球體的zui大直徑達(dá)1mm,。在檢測了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤體外產(chǎn)生的蛋白后,,研究人員發(fā)現(xiàn)三維培養(yǎng)表達(dá)了適當(dāng)?shù)牡鞍祝鴮?duì)應(yīng)的二維培養(yǎng)沒有,。他們認(rèn)為,,三維培養(yǎng)適合這些腫瘤的研究,。而二維培養(yǎng)中蛋白的缺乏,表明它不是研究癌癥的有效方法,。

萊斯大學(xué)生物工程系的副教授Robert Raphael認(rèn)為:這種方法的美就在于它利用天然的細(xì)胞間相互作用來驅(qū)動(dòng)三維結(jié)構(gòu)的形成,。此方法相當(dāng)簡單,任何對(duì)藥物開發(fā),、干細(xì)胞或再生醫(yī)學(xué)感興趣的實(shí)驗(yàn)室都可以此作為三維細(xì)胞培養(yǎng)的起點(diǎn),。

這種三維組織培養(yǎng)有望應(yīng)用在疾病研究上。M.D. Anderson癌癥中心的Wadih Arap教授表示:對(duì)于癌癥研究,,磁場所產(chǎn)生的隱性支架已經(jīng)不再是單純的細(xì)胞培養(yǎng),,而讓它們更像真正的腫瘤。我們下一步將應(yīng)用這種磁性來探索腫瘤成像和治療上的應(yīng)用

 

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