三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘,。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,，如微量移液器，吸頭,，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用,。）

四,、操 作 步 驟
1．取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔,，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中（空白孔視為0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2,、分別標(biāo)記樣品編號(hào)，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）,。
3,、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘；
4,、將酶標(biāo)板板取出,，將其中的液體甩去，每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,，立即甩去液體;
5,、每個(gè)孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
6,、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
7,、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液,。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘,。
9,、將酶標(biāo)板取出，將其中的液體甩去,，每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,，立即甩去液體。
10,、每個(gè)孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
11,、重復(fù)第5個(gè)步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
12,、在每個(gè)孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻,。（A液,、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘,。
14,、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液,，輕輕振蕩混勻。
15,、在酶標(biāo)儀上,，450nm處測(cè)定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,。
16,、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本含量