誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法

在體外培養(yǎng)條件下，動物細(xì)胞會自發(fā)融合,，但是頻率極低,。因此，一般都需要添加具有誘導(dǎo)細(xì)胞融合效應(yīng)的生物或化學(xué)藥劑,，或者采用電融合技術(shù),，人為地促進(jìn)細(xì)胞融合。

病毒誘導(dǎo)融合 

病毒是zui早采用的融合劑,。常用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的病毒有仙臺病毒,、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,，其中仙臺病毒zui常用,。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內(nèi)酯滅活，使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性,。用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合,，融合率較高，對各種動物細(xì)胞都適宜,，且仙臺病毒能在雞胚中大量繁殖,，容易培養(yǎng)；但是仙臺病毒不穩(wěn)定,，在保存過程中融合活性會降低,，并且制備過程比較煩瑣。此外,，病毒引進(jìn)細(xì)胞后,，可能會對細(xì)胞的生命活動產(chǎn)生干擾,。

聚乙二醇PEG誘導(dǎo)融合 

聚乙二醇PEG具有強(qiáng)烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白質(zhì)的作用，能夠有效地促進(jìn)植物原生質(zhì)體和動物細(xì)胞的融合,。在不同種類的動物細(xì)胞混合液中加入聚乙二醇,，就會發(fā)生細(xì)胞凝集作用；在稀釋和除去聚乙二醇的過程中,，就會發(fā)生細(xì)胞融合,。聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合的機(jī)理，目前還不太清楚,。聚乙二醇是化學(xué)試劑,，使用起來很方便，誘導(dǎo)細(xì)胞融合的頻率比較高,，但是它有一定毒性,，對有些細(xì)胞（如卵細(xì)胞）不適用。

電融合

 20世紀(jì)80年代建立起來的電融合技術(shù),，是將兩種細(xì)胞的混合液置于低壓交流電場中,，使細(xì)胞聚集成串珠狀，然后施加高壓電脈沖,，以促使細(xì)胞融合,。緊密排列的細(xì)胞，在相互接觸的細(xì)胞膜之間會出現(xiàn)無蛋白顆粒的脂質(zhì)區(qū),，當(dāng)受到電擊時,，這個區(qū)域就會被擊穿，產(chǎn)生脂雙層膜孔,，導(dǎo)致細(xì)胞之間的細(xì)胞質(zhì)連通,，進(jìn)而發(fā)生細(xì)胞融合。電融合技術(shù)有許多優(yōu)點,，如誘導(dǎo)細(xì)胞融合的頻率高,，對細(xì)胞無毒害作用，操作簡便,，可重復(fù)性好,。
 



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