1 冷凍管應(yīng)如何解凍,？
取出冷凍管后,， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍,， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,， 否則易發(fā)生污染情形,。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)， 必須注意安全,， 預(yù)防冷凍管之爆裂,。 

2 懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？
一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,， 稀釋細(xì)胞濃度即可,， 若培養(yǎng)液太多時(shí)， 可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,， 直到無法容納為止,。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶， 加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,， 重復(fù)前述步驟即可,。

3 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能,。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),， 造成細(xì)胞無法存活,。

4 何謂FBS, FCS, CS, HS ? FBS fetal bovine serum 和FCS fetal calf serum 是相同的意思， 兩者都是指胎牛血清,， FCS 乃錯(cuò)誤的使用字眼,， 請(qǐng)不要再使用。CS calf serum 則是指小牛血清,。HS horseserum 則是指馬血清,。
 
5 培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 % 或10% CO2？或根本沒有影響,？
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng),， 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2 濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時(shí),，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2,；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時(shí)， 則應(yīng)使用5 % CO2 培養(yǎng)細(xì)胞,。

6 何時(shí)須更換培養(yǎng)基,？
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定， 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可,。
 
7 培養(yǎng)基中是否須添加抗生素,？
除于特殊篩選系統(tǒng)中外,， 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,， 培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
 
8 附著性細(xì)胞繼代時(shí)所使用之trypsin-EDTA 濃度,？應(yīng)如何處理,？ 一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,， 保存于-20 °C,，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低， 并可減少污染之機(jī)會(huì),。

9 如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),，應(yīng)如何處理？
直接滅菌后丟棄之,。




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