ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,，國內(nèi)醫(yī)學檢驗一般均用板式點,。    本文將敘述板式ELISA試劑盒各個操作步驟的注意要點，珠式,、管式及磁性球ELSIA,，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用。按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。

       ELISA試劑盒中用的蒸餾水或去離子水,，包括用于洗滌的,，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正,。從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用,。試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。

       ELISA試劑盒的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,，注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復溶,。 一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,。可利用標準的ELISA操作流程,、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。為了優(yōu)化靈敏度,，建議孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。

      可用作ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,，體液（如血清 ）,、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體 或抗原成份,。ELISA試劑盒有些標本可直接進行測定（如血清 ,、尿液），有些則需經(jīng)預處理（如糞便和某些分泌物）,。這些標本收集的時間,、方法和保存都有一定的要求。