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研域生物分析酶聯(lián)免疫試劑盒屬固相免疫測定,,抗原,、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例,,加入板孔中的標(biāo)本,,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸,。
如果對試劑準(zhǔn)備不太注意,,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將酶聯(lián)免疫分析試劑盒從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題影響后面的操作,。測定中試劑的準(zhǔn)備最為關(guān)鍵的是,,在實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20min以上后,。
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡,。
2. 洗滌過程非常重要,,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔,。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,,請先稀釋后再測定。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液工作液時(shí),,請以相應(yīng)的稀釋液配制,ELISA試劑盒不能混淆,。
7. 底物請避光保存,。
8.控制好每一步的操作時(shí)間。
在使用前與室溫平衡,,再進(jìn)行測定,。在酶聯(lián)免疫試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育,,有人稱之為孵育,,在酶聯(lián)免疫試劑盒中似不恰當(dāng)。
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