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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>血清使用中的常見(jiàn)問(wèn)題解析
在血清使用中,,常常會(huì)遇到各種問(wèn)題,以下就一些常見(jiàn)問(wèn)題進(jìn)行解答,。
1.保存血清什么辦法,?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無(wú)法用完一瓶,,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。
2.怎樣避免出現(xiàn)沉淀物,?
我們建議您在使用血清的時(shí)候,,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長(zhǎng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中
3.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
4.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理,?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的,;而血纖維蛋白在血清解凍后,,也會(huì)存在于血清中,,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量,。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜,。
5.什么事熱滅活?有必要做熱滅活嗎,?
一般以56℃,,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,,可以使補(bǔ)體去活性,,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和激活,。
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)過(guò)處理的血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。
而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。
若非必須,可以不需要做熱滅活這一步,,更確保血清的質(zhì)量!
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