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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

上海研域生物講解小鼠ELISA雙抗體夾心法操作步驟

時間:2024-1-10閱讀:1053

上海研域生物一路走來依靠豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì),、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間,、具競爭力的價格的優(yōu)勢等,下面研域生物講解小鼠ELISA雙抗體夾心法操作步驟有哪些:

小鼠ELISA雙抗體夾心法

(1)包被:用包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1-10 μg/mL,。在酶標(biāo)板反應(yīng)孔中加0.1 mL,,4℃過夜。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗板3 次,每次3 min,。

(2)加樣:加一定濃度稀釋的待檢樣品(同時做空白對照,,陰性對照孔及陽性對照)0.1 mL 于上述已包被的反應(yīng)孔中,,置濕盒中,,37℃, 1 hr,。用洗滌緩沖液洗板3 次,,每次3 min。

(3)加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體 (經(jīng)滴定后的稀釋度) 0.1ml,。37℃,0.5 - 1 hr,,用洗滌緩沖液洗板3 次,,每次3 min。

(4)加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入現(xiàn)配的TMB 底物溶液0.1 mL,,37 ℃,,10 - 30min。

(5)終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入終止液0.05 mL,。

(6)結(jié)果判定:將酶標(biāo)板在酶標(biāo)儀上,,于450 nm (若ABTS 顯色,讀410 nm),,讀數(shù),,輸出到Excel 中,。

(7)以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),,生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和直線回歸方程式,,根據(jù)公式計算未知樣品的濃度,并記錄,。

上海研域生物小鼠ELISA雙抗體夾心法采用進(jìn)口材料生產(chǎn),,專業(yè)的酶免專家,提供免費(fèi)代測,,數(shù)據(jù)分析,,技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品遠(yuǎn)銷全國各地,。多年以來我們以極其苛刻的要求控制產(chǎn)品的質(zhì)量,,堅持生物科學(xué)研究與世界同步的理念。

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