在小鼠ELISA中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括:

(1)固相載體的選擇: 許多物質可作為固相載體,，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。

(2)小鼠ELISA試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇: 將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4C18~24小時,。蛋白質包被的合適濃度需進行滴定: 即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/m1等)進行包被后,，在其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/m1,。

(3)酶標記抗體工作濃度的選擇: 首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。

(4)小鼠ELISA試劑盒的酶的底物及供氫體的選擇: 對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應,，而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護,。有條件者應使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H202在臨用前加入,。

以上是上海研域生物給你講講小鼠ELISA實驗條件重要的選擇,。