大鼠ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。下面上海研域生物普及大鼠ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，大鼠ELISA試劑盒應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。大鼠ELISA試劑盒用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可 將標(biāo)本放于 -20 ℃保存,，但 應(yīng) 避免反復(fù)凍融 .

7.  不能檢測含NaN3的樣品 ，大鼠ELISA試劑盒因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

大鼠ELISA試劑盒操作步驟：

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,，在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100 μ l,，然后在第一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50 μ l,，混勻；然后從第一孔,、第二孔中各取100 μ l分別加到第三孔和第四孔,，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50 μ l,，混勻,；然后在第三孔和第四孔中先各取50 μ l棄掉，再各取50 μ l分別加到第五,、第六孔中,，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻,；混勻后從第五、第六孔中各取50 μ l分別加到第七,、第八孔中,，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50 μ l,，混勻后從第七,、第八孔中分別取50 μ l加到第九、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50 μ l,，混勻后從第九第十孔中各取50 μ l棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50 μ l,，濃度分別為1800ng/L,，1200ng/L ，600ng/L,，300ng/L,， 150ng/L ）。

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）,、 待測樣品孔 。大鼠ELISA試劑盒在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 μ l,，然后再加待測樣品10 μ l（樣品最終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,， 輕輕 晃動 混勻 ,。