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研域生物血清的作用:
1.提供對維持細胞指數生長的激素,,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物,。
2.提供結合蛋白,,能識別維生素,、脂類,、金屬和其他激素等,能結合或調節(jié)它們所結合的物質活力,。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源,。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,,保護細胞不受傷害。
7.參與細胞凍存,。
在細胞培養(yǎng)中,,胎牛血清加入基礎培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,,應依據文獻報導,,或細胞類型或基礎培養(yǎng)基的成分來確定適宜濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,,運輸應干冰冷鏈運輸,,避免反復凍融,,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質,。
雖然血清也存在一些弊端,,比如存在不少有害成分(補體、免疫球蛋白和一些生長抑制因子等),,血清成分不明確,,影響對結果的分析,不同動物,、不同批次的血清成分和活性有很大不同,,使得培養(yǎng)結果不穩(wěn)定,盡管如此,,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,,尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),,待細胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液,。
血清注意:
在水浴過程中,血清的平面要浸在水中,。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,,使血清混勻,但搖動中盡量不要產生泡沫!
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