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NSE Elisa試劑盒產(chǎn)品說明書
試劑盒組成(貯存于2-8C):
酶標板(Coated Wells) 812 酶聯(lián)物(Conjugate Reagent) 12ml
樣品稀釋液(Sample Diluent) 12ml 標準品(Standards) 1 set
終止液(Stop Solution) 12ml TMB顯色液(TMB Solution) 12ml
濃縮洗滌液(20x) 30ml
準備工作:
濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至600ml),。未用完的放回2-8C,。
每瓶標準品用1ml雙蒸水重建,靜置20分鐘后輕輕混勻,。重建的標準品請貯藏于2-8C,。
操作步驟:
試劑盒應(yīng)平衡至室溫再試驗。 取出所需反應(yīng)板,。
分別加入25ul標準品(Standards),、25ul血清于反應(yīng)板孔中。
每孔加入100ul 樣品稀釋液,。輕輕混勻30秒,。20-25C溫育30分鐘。
洗板:甩盡板內(nèi)液體,,用洗滌液(1x)洗滌反應(yīng)板,,并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干);這樣反復(fù)洗滌5次,。
每孔加入100ul酶聯(lián)物(Reagent),輕輕混勻10秒,。20-25C溫育30分鐘。
洗板:甩盡板內(nèi)液體,用洗滌液(1x)洗滌反應(yīng)板,,并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干),;反復(fù)洗滌5次。
每孔加入100ulTMB顯色液,,輕輕混勻10秒鐘,,置室溫溫育20分鐘。
每孔加入100ul終止液(Stop Solution),。輕輕混勻30秒,;確定蘭色變?yōu)椋ㄖ匾?)。30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD值,。
以O(shè)D值為縱坐標,,以標準品濃度為橫坐標,繪制標準曲線,。根據(jù)血清樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度,。
示例:
NSE Values (ng/ml) Absorbance (450nm)
0 0.010
5 0.195
15 0.418
40 0.928
100 1.980
200 3.309
預(yù)期值:健康人NSE的水平小于15ng/ml。本試劑盒的靈敏度:1ng/ml,。
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