ELISA試劑盒質(zhì)量保證是一個復(fù)雜的過程，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量,。今天上海研域為您分享影響ELISA試劑盒質(zhì)保的七要素,。

一、方法學(xué)的影響

ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法,、間接法,、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法,、競爭抑制法,，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差,，質(zhì)量較難控制,。

二、試劑因素

不同批次的ELISA試劑盒試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件,。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短,、使用率低的試劑,，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可,，避免反復(fù)凍融造成試劑的失效,。

三、樣本因素

標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風(fēng)濕因子,、補體,、異嗜性抗體、自身抗體,、溶菌酶等,，后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染,、標(biāo)本貯存時間過長,、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等,。

四,、操作因素

ELISA操作步驟復(fù)雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差,。加樣,、溫育、洗滌,、顯色,、比色。

五,、灰區(qū)的設(shè)置

通常情況下,，ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱為

“陽性判斷值"(cut-off value,，CO值),，這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。

第六,、標(biāo)本復(fù)查

ELISA試劑盒手工檢測過程復(fù)雜,，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控,，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法，比如對HBsAg,、HBeAg,、HCV-Ab、HIV-Ab,、TP-Ab等項目的可疑,、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測結(jié)果進行復(fù)查。

第七,、常表示結(jié)果的常用方法

1.定性測定

2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示,。

3.定量測定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進行ELISA測定,，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以jue對量或單位表示,。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。