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小鼠促卵泡素(FSH)檢測原理,!
產(chǎn)品名稱:小鼠促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T
儲存條件:2-8℃,,避光防潮保存
有效期:6個月
檢測原理:
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠促卵泡素(FSH)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并澈底洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的,。顏色的深淺和樣品中的小鼠促卵泡素(FSH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
實(shí)驗(yàn)步驟(僅供參考)
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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