細胞培養(yǎng)中如何消除組織培養(yǎng)的污染

當重要的培養(yǎng)污染時,，研究者可能試圖消除或控制污染,。首先,，確定污染物是細菌、真菌,、支原體或酵母,，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,，檢查HEPA過濾器,。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，elisa試劑盒因而,，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平,。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。
 
1. 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化,、計數(shù)和稀釋細胞,，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。 

2. 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,，或幾個小培養(yǎng)瓶中,。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中,。例如,，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25,，0.50,，1.0，2.0,，4.0,8.0 mg/ml,。 
 
3. 每天觀測細胞毒性指標，如脫落,，出現(xiàn)空泡,，匯合度下降和變圓。  

4. 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2～3代,。 

5. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代,。 elisa試劑盒

6. 重復步驟4。 

7. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代,，確定污染是否以已被消除,。