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詳解ELISA試劑盒方法設(shè)計的原理根據(jù)是什么?
在今天的技術(shù)內(nèi)容中,我們公司為您詳解ELISA方法設(shè)計的原理根據(jù),。
ELISA試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),,將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù),。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。
應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒在的實際應(yīng)用中,,通過不同的設(shè)計,,具體的方法步驟可有多種。
如雙抗體夾心法,、間接法,、競爭法、雙位點一步法,、捕獲法測IgM抗體,、應(yīng)用親和素和生物素的ELISA。ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的,。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品的濃度。
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