ELISA試劑盒的這些事項(xiàng)要注意
使用ELISA檢測試劑盒進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,，說明有非特異性反應(yīng)。
在ELISA中,，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,，其中包括：
固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被,，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度,，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后,，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值大而蛋白量少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。

除此之外還要注意以下事項(xiàng)：
1.確定ELISA檢測試劑盒在有效期內(nèi),；
2.仔細(xì)閱讀說明書,；
3.按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）,；
4.標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,，注意低溫保存；
5.根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量,；
6.準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,，如試管、吸頭,、移液器,、離心機(jī)等；
7.按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑,。