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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域(上海)剖析:ELISA試劑盒樣本處理的注意關(guān)鍵
ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的,,如血清,、血漿、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等,,不同類型的檢測樣本前期的處理辦法是不一樣的。試驗(yàn)樣本的處理可謂是ELISA試驗(yàn)的關(guān)鍵過程之一,,所以科研朋友一定要多加注意,。詳細(xì)關(guān)鍵那么就由研域(上海)來為您剖析吧!
一,、均質(zhì)
①安排樣本:肉,、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎,,混合均勻,。
②水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),,用均質(zhì)器均漿,;質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
③蛋類:鮮蛋去殼,,蛋黃和蛋白充沛混勻,。
④水果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,,然后除去外表的水分,,取食用部分。
二,、振動(dòng)提取
將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,,振動(dòng),使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排內(nèi)部,,提取待測組分,。
①振動(dòng)辦法:振動(dòng)器上進(jìn)行上下、往復(fù)式振動(dòng),、手搖式上下振動(dòng),。
②在安排樣本中參加有機(jī)溶劑之間提取時(shí),ELISA試劑盒應(yīng)邊加邊振動(dòng),,防止安排凝結(jié)成團(tuán),,不利于提取。
三,、乳化現(xiàn)象
在用有機(jī)溶劑提取過程中,,假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,,處理的辦法有:
①用細(xì)頭輕輕的拌和,損壞乳化后,,再重復(fù)離心,。
②再參加適量的提取劑,重新振動(dòng),。注意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變,。
四、濃縮
因?yàn)閮艋^程中引進(jìn)的溶劑,,可能會(huì)降低待測組分的濃度或者不適宜直接剖析,需要去除全部有機(jī)溶劑,。即試劑盒前處理過程中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈?,再用?fù)溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮辦法:氮?dú)獯蹈沙s,、壓縮空氣吹干除雜,。
請(qǐng)注意:
①在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,,防止雜質(zhì)攪擾,。
②在吹樣本時(shí),針頭應(yīng)在液面上空,,防止與樣本觸摸,,防止發(fā)生交叉污染。
③樣本吹干后應(yīng)立即取下,,防止吹的時(shí)刻過長,,影響zui終檢測結(jié)果。
④不同的藥物,,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,,ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
五,、凈化
經(jīng)過提取的待測組分中一般含有一些會(huì)攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì),。將待測組分與雜質(zhì)別離的過程,咱們稱為試劑盒中樣本的凈化,。在咱們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到的zui常見的凈化是:液液分配法,。
比方:用復(fù)溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適量的正己烷,在參加正己烷和復(fù)溶液渦動(dòng)后假如呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,,能夠60℃水浴加熱,,至乳化現(xiàn)象消失或削弱后,加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心,。
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