ELISA試劑盒陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對(duì)許多標(biāo)本的試驗(yàn)查看而得到的。ELISA試劑盒陽性判定值（cut-off value）一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),，以此作為差異效果陽性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。

用此法差異效果央求試驗(yàn)條件十分穩(wěn)定,，試劑的制備有必要標(biāo)準(zhǔn)化,，陽性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合必定的標(biāo)準(zhǔn)，須配用精細(xì)的儀器,，并嚴(yán)峻按規(guī)則操作,。

ELISA試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，目視法簡(jiǎn)捷明晰,，但頗具主觀性,。

ELISA試劑盒試驗(yàn)3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,，并≤1.5×NCX,，如其中之一超出此計(jì)劃,，則棄去,，算了另兩個(gè)陰性對(duì)照從頭核算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上計(jì)劃,，則該次試驗(yàn)無效,。在條件許可下,，應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,，這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù),。  現(xiàn)舉某種查看 HBsAg的試劑盒為例,先讀出標(biāo)本（sample，S）,、陽性對(duì)照（P）、和陰性對(duì)照（N）的吸光值,，然后進(jìn)行核算,。核算辦法有多種，大致可分為陽性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類,。陽性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml,。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照,。

測(cè)得A值后，先核算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)（NC X ）和陽性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX）,，兩個(gè)平均數(shù)的差（P-N）有必要大于一個(gè)特定的數(shù)值（例0.400）,，試驗(yàn)才有用。

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