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ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬組胺,,用純化的豬組胺抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次加豬組胺,,再與HRP標(biāo)記的豬組胺(HIS)抗體結(jié)合,,形成抗體抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗刷后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終究的,。se彩的深淺和樣品中的豬組胺呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度,,通過(guò)規(guī)范曲線計(jì)算樣品中豬組胺濃度,。
防止直接觸摸停止液和底物A、B,。一旦觸摸到這些液體,,請(qǐng)趕快用水沖洗。
試驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或運(yùn)用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽闡明書(shū)貯存,,運(yùn)用前恢復(fù)到室溫,,稀稀過(guò)后的規(guī)范品應(yīng)丟掉,不行保存,。
試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,防止蛻變,。
不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前運(yùn)用,。
運(yùn)用一次性的吸頭防止交叉污染,吸取停止液和底物A,、B液時(shí),,防止運(yùn)用帶金屬部分的加樣器。
上海豬ELISA試劑盒中的底物A應(yīng)揮發(fā),,防止長(zhǎng)時(shí)刻打開(kāi)蓋子,,底物B對(duì)光敏感,防止長(zhǎng)時(shí)刻露出于光下,。防止用手觸摸,,有毒。試驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
運(yùn)用干凈的塑料容器配置洗刷液,。運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗刷酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充沛拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
加入試劑的次序應(yīng)共同,以保證一切反應(yīng)板孔溫育的時(shí)刻相同,。
依照闡明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)刻,、加液的量及次序進(jìn)行溫育操作,。
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