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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域(上海)為客戶剖析ELISA操作問題
今天下午,,上海有機(jī)研究所張老師致電給我司吳,,張老師表明于7月8日購買的我公司Elisa試劑盒現(xiàn)已收到貨,,即將開始試驗(yàn),,但是有幾個問題需要咨詢。
對此研域(上海)生物技術(shù)員為客戶分析Elisa操作問題:
一,、細(xì)胞上清液樣本怎么處理,?
答:檢測分泌性的成份時,用無菌管搜集,。離心20分鐘左右(1000×g),。仔細(xì)搜集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度抵達(dá)100萬/ml左右,。經(jīng)過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g),。仔細(xì)搜集上清,。保存過程中如有沉淀構(gòu)成,應(yīng)再次離心,。
二,、為什么有的試劑盒是選用競賽Elisa法?
答:小分子抗原或半抗原因?yàn)槿鄙倏勺鲓A心法的兩個以上的位點(diǎn),,因而不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,,可以選用競賽法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競賽生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn),,標(biāo)本中抗原量含量愈多,,結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少,zui后的顯色也愈淺,,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比,。小分子激素、藥物等Elisa測定多用此法,。
三,、用什么軟件處理Elisa檢測的數(shù)據(jù)比較好?
答:Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以使用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,。它使用非常便利,,可以生成美麗的曲線使用到論文之中。
問題解決后,,張老師表明對我公司試劑盒的售后服務(wù)非常滿意。非常感謝上海有機(jī)研究所張老師對研域(上海)生物公司的支撐與信任,,試驗(yàn)后有效果分析等問題,也都可以隨時,。
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