改良Lowry法蛋白定量試劑盒

許多年來Lowry法是zui常用也是被引用次數(shù)zui多的蛋白質(zhì)定量方法,。其原理是在堿性條件和福林酚Folin-Ciocalteu Reagent存在下,，銅離子與蛋白質(zhì)形成可溶性蘭色復(fù)合物，在750 nm有zui大光吸收值,。Lowry法的優(yōu)點是靈敏度高,，對脂質(zhì)、SDS等干擾物質(zhì)不甚敏感,。經(jīng)典Lowry法的主要缺點是,，每次蛋白定量之前必須用兩種不同的試劑A和B （Reagent A and B）新鮮配制堿性銅試劑（Reagent C）。堿性銅試劑（Reagent C）不穩(wěn)定因而必須每天新鮮配制,；另外,，經(jīng)典Lowry法產(chǎn)生的蛋白顏色復(fù)合物穩(wěn)定性較差，在反應(yīng)20-120分鐘內(nèi)變化9.2%,；蛋白濃度低于15μg/ml時標(biāo)準(zhǔn)曲線的重復(fù)性較差,；本試劑盒采用改良的Lowry法,，用單一添加有穩(wěn)定劑的堿性銅試劑代替經(jīng)典Lowry法的試劑A、試劑B,、和試劑C,。這種改良堿性銅試劑在室溫下穩(wěn)定12個月以上；測定反應(yīng)產(chǎn)生的銅蛋白-藍色復(fù)合物相當(dāng)穩(wěn)定,，在2小時內(nèi)的變化不超過0.3%,；反應(yīng)曲線幾乎100%與原有方案吻合，重復(fù)性佳,。因而改良Lowry法蛋白定量試劑盒與BCA法蛋白質(zhì)定量試劑盒一樣,，具有非常好的試劑穩(wěn)定性、檢測靈敏度,、和重復(fù)性,，并且測定過程變得十分簡捷，是經(jīng)典Lowry法忠實用戶的理想選擇,。