薄層色譜法(thin layer chromatography簡(jiǎn)寫TLC)是一種物理化學(xué)的分離技術(shù),，常用于藥物的分離與分析。現(xiàn)對(duì)此方法的分析步驟及留意事項(xiàng)提點(diǎn)建議,。 完成TLC分析通常需經(jīng)制板,、點(diǎn)樣、展開,、檢出4步操縱,。     ⑴制板  在一平面支持物(通常為玻璃)上,，均勻地涂制硅膠,、氧化鋁或其他吸附劑薄層、樣品的分離,、檢測(cè)就在此薄層色譜板上進(jìn)行,。  一般選用適當(dāng)規(guī)格的表面光滑平整的玻璃板。常用的薄層板規(guī)格有：10cm×20cm,、5cm×20cm,、20cm×20cm等。稱取適量硅膠,，加進(jìn)0.2％～0.5%羧甲基纖維素鈉溶液（CMC-Na）,，充分?jǐn)嚢杈鶆颍M(jìn)行制板。一般來說10cm×20cm的玻璃板,，3～5g硅膠/塊,；硅膠與羧甲基纖維素鈉的比例一般為1：2～1：4。制好的玻璃板放于水平臺(tái)上,，留意防塵,。在空氣中自然干燥后，置1l0℃烘箱中烘0.5～lh,，取出,，放涼，并將其放于紫外光燈(254nm)下檢視,，薄層板應(yīng)無花斑,、水印，方可備用,。     ⑵點(diǎn)樣  用微量進(jìn)樣器進(jìn)行點(diǎn)樣,。點(diǎn)樣前，先用鉛筆在層析上距末端lcm 處輕輕畫一橫線,，然后用毛細(xì)管吸取樣液在橫線上輕輕點(diǎn)樣,，假如要重新點(diǎn)樣，一定要等前一次點(diǎn)樣殘余的溶劑揮發(fā)后再點(diǎn)樣,，以免點(diǎn)樣斑點(diǎn)過大,。一般斑點(diǎn)直徑大于2mm，不宜超過5mm.底線距基線1～2．5cm,，點(diǎn)間間隔為lcm左右,，樣點(diǎn)與玻璃邊沿間隔至少lcm，為防止邊沿效應(yīng),，可將薄層板兩邊刮往1～2cm,，再進(jìn)行點(diǎn)樣。     ⑶展開  將點(diǎn)了樣的薄層板放在盛在有展開劑的展開槽中,，由于毛細(xì)管作用,，展開溶劑在薄層板上緩慢前進(jìn)，前進(jìn)至一定間隔后,，取出薄層板,，樣品組分固移動(dòng)速度不同而彼此分離。  ① 展開室應(yīng)預(yù)飽和,。為達(dá)到飽和效果,，可在室中加進(jìn)足夠量的展開劑；或者在壁上貼兩條與室一樣高,、  寬的濾紙條,，一端浸進(jìn)展開劑中,，密封室頂?shù)纳w。  ② 展開劑一般為兩種以上互溶的有機(jī)溶劑,，并且臨用時(shí)新配為宜,。 ③ 薄層板點(diǎn)樣后，應(yīng)待溶劑揮發(fā)完,，再放人展開室中展開,。  ④ 展開應(yīng)密閉，展距一般為8～15cm,。薄層板放進(jìn)展開室時(shí),，展開劑不能沒過樣點(diǎn)。一般情況下,，展開劑浸進(jìn)薄層下真?zhèn)€高度不宜超過0.5cm,。 ⑤ 展開劑每次展開后，都需要更換,，不能重復(fù)使用,。  ⑥ 展開后的薄層板用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ谷軇]發(fā),，然后進(jìn)行檢視,。  ⑦ Rf值一般控制在0.3～0.8，當(dāng)Rf值很大或很小時(shí),，應(yīng)適當(dāng)改變活動(dòng)相的比例,。     ⑷ 斑點(diǎn)的檢出  展開后的薄層板經(jīng)過干燥后，常用紫外光燈照射或用顯色劑顯色檢出斑點(diǎn),。對(duì)于無色組分,，在用顯色劑時(shí)，顯色劑噴灑要均勻,，量要適度,。紫外光燈的功率越大，暗室越暗,，檢出效果就越好,。  展開分離后，化合物在薄層板上的位置用比移值(Rf值)來表示,?；衔锇唿c(diǎn)中心至原點(diǎn)的間隔與溶劑前沿至原點(diǎn)的間隔的比值就是該化合物的Rf值,。