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薄層色譜法斑點拖尾原因

時間:2017/7/17閱讀:15319
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1,、產(chǎn)生原因及克服方法
(1)點樣過量在薄層色譜過程中化合物在薄層板上進行吸附———解吸附的移動過程中,,任何一類吸附劑,它們的負載化合物的能力是有一定限度的,,因點樣過量而超載后,,過剩的化合物被拋在后面,形成拖尾現(xiàn)象,。
(2)重復(fù)點樣樣點雖在同一垂直線而樣點圓心未重合,,致使樣點呈近橢圓形,也是形成拖尾現(xiàn)象的又一原因,,為避免以上異常現(xiàn)象,,應(yīng)選擇合適的點樣量和復(fù)點樣過程中,,樣點圓心應(yīng)重合。
2,、邊緣效應(yīng)
邊緣鏟應(yīng)是樣品在層析時,,薄層板兩邊的斑點比中間斑點移動快,并向兩邊偏斜,。其原因是用混合溶劑展開過程中,,其中性較弱和沸點較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發(fā),使薄層板上展開劑的比例不一致,,性發(fā)生變化,,而出現(xiàn)邊緣效應(yīng)。
為避免上述現(xiàn)象的出現(xiàn):增加層板缸中溶劑蒸氣濃度,,在層析缸內(nèi)壁貼上浸濕展開劑的濾紙或選擇內(nèi)徑和長度適宜的層析缸進行層析,。選擇適宜的單一溶劑代替混合溶劑。采用共沸溶劑代替一般混合溶劑,。
3,、S形及波形斑點
S形斑點是指含多種成分的樣品層析時,斑點不是順次分布于原點至展開前沿的垂直線上,,而是呈s形分布于垂直線兩側(cè),。波形斑點是指某些含多種成分的樣品液,順次點于同一起始線上,,展開后,,這些成分相同的斑點不呈直線狀平行于起始線,而是呈波浪形。
產(chǎn)生原因為薄層板厚薄不勻,。為避免上述現(xiàn)象的出現(xiàn)應(yīng)選用厚薄均勻的薄層板,。
4、念珠狀斑點
念珠狀斑點是指化合物斑點之間距離小,,相互連接呈念珠狀,。
產(chǎn)生原因及克服方法:樣品中成分過多,在一定長度的薄層板上,,排布不開,,彼此重疊??蛇m當增加層析板長度,,使斑點距離加大或采用雙向?qū)游觯顾煞窒騼蓚€方向展開可以避免念珠狀斑點的出現(xiàn),。多次點樣時,,點樣中心不重合,形成復(fù)斑,。應(yīng)以適當濃度供試液一次點樣,,若多次點樣,點樣中心必須重合,。
5,、展開后斑點RF值不穩(wěn)定斑點RF值與文獻規(guī)定不符或重復(fù)操作RF值時大時小。
主要原因為:層析溫度不穩(wěn)定,,在采用混合溶劑展開時,,由于溫度不穩(wěn)定使展開劑的比例發(fā)生變化。薄層厚薄不勻,。吸附劑溶劑質(zhì)量差異,。根據(jù)以上原因在層析過程中除選擇質(zhì)量較好的吸附劑與溶劑外,同批或同一品種應(yīng)選擇同廠,、同批號的吸附劑和溶劑,,層析時室溫差控制在5℃之間,制板時吸附劑顆粒應(yīng)選擇直徑顆粒制板,,板材平整,,薄層厚薄均勻。

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