研究細(xì)胞核及其組成成分,，如染色質(zhì),、DNA,、核內(nèi)小RNA以及各種復(fù)制和轉(zhuǎn)錄酶等，需分離制備細(xì)胞核,。
真核細(xì)胞的細(xì)胞核為有膜細(xì)胞器,，所分離的細(xì)胞核要保持核膜的完整性，核內(nèi)成分不外漏,，核外細(xì)胞質(zhì)成分不內(nèi)滲或敖附在核膜上,。通常用于分離細(xì)胞核的方法有3種，即有機(jī)溶劑法,、蔗糖法和檸檬酸法,。有機(jī)溶劑能阻止細(xì)胞質(zhì)的某些成分進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi),，但不能保持細(xì)胞核的正常形態(tài),，且可導(dǎo)致核內(nèi)一些酶的失活，常用于定量分析細(xì)胞核的生化成分及其他一些特殊目的,。蔗糖高速離心法較簡(jiǎn)單,，適用面廣，核純度高,，保持生物活性,，但要用高速離心機(jī)和較大量的蔗糖。檸檬酸法屬差速離心法,，只需低速離心機(jī),，細(xì)胞質(zhì)成分污染程度低，核破碎率也較低,，蔗糖用雖較小,，應(yīng)用廣泛。
一,、蔗糖高速離心法
將組織勻漿中細(xì)胞核游離出來(lái),，再經(jīng)過(guò)蔗糖密度梯度離心，將細(xì)胞核沉淀下來(lái),。蔗糖為低滲透壓介質(zhì),，能防止細(xì)胞核自溶。在梯度液中含有Ca2+,，能減少細(xì)胞核的脆性,。
二、檸檬酸低速離心法
取組織在一定濃度的檸檬酸溶液中勻漿,，通過(guò)差速離心將沉降系數(shù)較大的細(xì)胞核先沉淀下來(lái),。檸檬酸能除去紉胞質(zhì)里的酸溶性蛋白，整合二價(jià)陽(yáng)離子,，抑制酶,，減少校的破碎,。
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