概念解釋?zhuān)?/strong>暗場(chǎng)顯微(英文：Dark-field microscopy)或稱(chēng)暗視野顯微(英文：Dark ground microscopy)描述光學(xué)顯微和電子顯微中的一種特殊顯微手法,，除去觀(guān)測(cè)物體以外的光線(xiàn)或電子進(jìn)入物鏡,，使目鏡中觀(guān)測(cè)到的視野背景是黑的，只有物體的邊緣是亮的,。利用這個(gè)方法能見(jiàn)到小至 4~200nm的微粒子,，分辨率可比普通顯微法高50倍。
應(yīng)用簡(jiǎn)介
暗場(chǎng)顯微技術(shù)采用光學(xué)顯微鏡結(jié)合特殊的照明和觀(guān)察方式,，使得只有樣品大角度散射的光能夠進(jìn)入物鏡并被探測(cè)到,。采用暗場(chǎng)顯微技術(shù)，可以克服常規(guī)光學(xué)顯微（明場(chǎng)照明成像）針對(duì)均一樣品中的微小結(jié)構(gòu)成像時(shí),，透射或反射襯度不足的問(wèn)題,，使得微小的結(jié)構(gòu)在背景中得以突出呈現(xiàn)，特別適合顆粒,、纖維,、小尺度界面等的觀(guān)測(cè)。
圖1 同一樣品明場(chǎng)（A）,、暗場(chǎng)（B）像對(duì)比
位于襯底,、溶液、膠體或細(xì)胞中的金屬納米顆粒/團(tuán)簇是典型的均一樣品中的小尺度結(jié)構(gòu),，因此暗場(chǎng)顯微技術(shù)是一種非常有效的觀(guān)測(cè)手段,。更為有趣也更為重要的特性是，因?yàn)榧{米顆粒的介觀(guān)特征,、表面活性,，它們對(duì)電磁波的響應(yīng)既不同于單獨(dú)的原子/分子，也不同于長(zhǎng)程有序的晶體,。因此除了暗場(chǎng)散射成像以外,，進(jìn)一步研究此類(lèi)粒子散射光的光譜特征，有助于理解納米顆粒的尺度，狀態(tài),，動(dòng)力學(xué)過(guò)程,，以及與周邊環(huán)境的相互作用信息。暗場(chǎng)散射光譜廣泛用于金屬納米顆粒研究,，表面納米結(jié)構(gòu)研究,，納米管及納米線(xiàn)，以及Plasmon Ruler等,。
系統(tǒng)配置和關(guān)鍵部件
如同一般的微區(qū)光譜系統(tǒng),，暗場(chǎng)散射光譜可通過(guò)暗場(chǎng)顯微鏡（透射照明需配置暗場(chǎng)聚光器，落射照明需配置明暗場(chǎng)物鏡及落射暗場(chǎng)照明器）,，成像光柵光譜儀以及高靈敏度科研級(jí)CCD探測(cè)器構(gòu)成,。除顯微部分外，暗場(chǎng)散射光譜儀的配置主要考慮以下因素：
1）通常的散射譜較寬,，一般不需要太高的分辨率,；
2）光譜儀通常要兼顧成像，所以需要影像矯正的光譜儀,，并配置開(kāi)度較大的入口狹縫,；通常會(huì)在光柵位配置一面反射鏡用于成像，也可使用光柵的零級(jí)作為反射鏡來(lái)成像,；
圖2 金納米顆粒透射暗場(chǎng)散射光譜示意圖
暗場(chǎng)散射光譜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)由圖3所示,。在暗場(chǎng)顯微鏡的影像出口轉(zhuǎn)接光柵光譜儀，顯微鏡成像于光譜儀入口,。光譜儀入口狹縫開(kāi)到,，選擇反射鏡替代光柵（或?qū)⒐鈻挪ㄩL(zhǎng)設(shè)為“0”），可在光譜儀CCD上觀(guān)測(cè)暗場(chǎng)成像,；選擇感興趣的顆粒使其位于視場(chǎng)中心，狹縫調(diào)小,，光柵切換到適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)位置,，即可獲得暗場(chǎng)光譜。
解決方案
先鋒科技針對(duì)暗場(chǎng)散射系統(tǒng)提供靈活配置,，既可以為您提供獨(dú)立的純暗場(chǎng)散射系統(tǒng),，亦可在標(biāo)準(zhǔn)的RTS2共聚焦拉曼光譜系統(tǒng)上升級(jí)暗場(chǎng)散射功能。
序號(hào) 項(xiàng)目 推薦配置 說(shuō)明
1 顯微鏡 正置：Leica DM2700M或Olympus BX51
倒置：主流倒置顯微鏡（透射暗場(chǎng)）
必須配置電動(dòng)樣品臺(tái) 如果要兼容倒置拉曼,，則顯微鏡為Nikon Ti2-U或Olympus IX73/83雙層熒光轉(zhuǎn)盤(pán)光路
2 光譜儀 300或500mm焦長(zhǎng)光譜儀
低刻劃密度光柵 單窗口光譜范圍要求500-600nm
3 CCD相機(jī) DU920,940,971（純暗場(chǎng)）
iVac316 （拉曼兼容） 純暗場(chǎng)需要較大靶面的相機(jī),，拉曼兼容可使用拉曼CCD相機(jī)
暗場(chǎng)散射實(shí)測(cè)結(jié)果
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