色譜柱的發(fā)展,,經(jīng)歷了從不定型硅膠到高純球型硅膠、從低pH條件下不穩(wěn)定到穩(wěn)定的過(guò)程,。但硅膠在高pH條件下極度不穩(wěn)定的問(wèn)題,,始終沒(méi)有很好的解決方案,直到雜化顆粒的誕生,。雜化顆粒集合了有機(jī)和無(wú)機(jī)填料的優(yōu)點(diǎn),,既具有純硅膠填料的高柱效、高機(jī)械強(qiáng)度及保留穩(wěn)定性能,,又具有聚合物填料的寬pH范圍穩(wěn)定性和抑制硅醇基的酸性的特性,,使其在堿性流動(dòng)相中也能游刃有余。
與傳統(tǒng)硅膠顆粒色譜柱相比,,雜化顆粒色譜柱具有耐受堿性流動(dòng)相的特點(diǎn),。傳統(tǒng)C18硅膠顆粒色譜柱推薦的流動(dòng)相pH為8,這是因?yàn)樵诟遬H條件下,,硅膠填料開(kāi)始溶解,,鍵合相也會(huì)水解(反應(yīng)機(jī)理為:在堿性條件下,OH-親核進(jìn)攻硅膠基質(zhì),,發(fā)生親核取代反應(yīng),,導(dǎo)致硅膠溶解及鍵合相的水解),導(dǎo)致柱效下降,。而雜化顆粒因嵌入硅甲基,,親核取代反應(yīng)放緩,顆粒表面溶解速度明顯放緩,,所以色譜柱壽命大大延長(zhǎng),。
傳統(tǒng)的C18硅膠色譜柱在分析堿性化合物時(shí),峰形有時(shí)候會(huì)很糟糕,,這是因?yàn)楣璐蓟c堿性化合物存在離子交換作用,,導(dǎo)致拖尾,雖然一些色譜柱采用封端這一方法來(lái)改善拖尾,,但是封端不可能*進(jìn)行,,還是會(huì)有殘留硅醇基,拖尾在所難免。而雜化顆粒在合成之時(shí)就引入硅甲基,,從根源上減少了硅醇基,,所以雜化顆粒酸性的降低使其在寬pH范圍內(nèi)為堿性化合物帶來(lái)了對(duì)稱的峰形。在方法開(kāi)發(fā)的流動(dòng)相pH優(yōu)化階段,,雜化顆粒色譜柱可為不同pKa值酸性和堿性的混合分析物的分離提供了更寬的選擇面,。
當(dāng)緩沖鹽流動(dòng)相的pH由3.75提高到10.0時(shí),雜化顆粒色譜柱可以使一些堿性分析物的柱容量提高20倍或更高,。在低pH條件時(shí),,堿性分析物處于質(zhì)子化的狀態(tài),離子間的相互排斥影響其與固定相的吸附,,所以對(duì)堿性分析物來(lái)說(shuō),,柱容量有限,。而本產(chǎn)品由于可以使用堿性流動(dòng)相,,由此可以提高柱容量,這對(duì)堿性分析物的色譜制備具有重大意義,。
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