免疫親和柱基于抗原抗體反應，特異性抗體連接在柱體內,，選擇性吸附樣品中的待檢物,，雜質不被吸附，流出柱外,，柱上結合的目標物再被特定的洗脫液洗下來,，可以用于液相色譜分析或者ELISA含量測定，是一種高效的前處理柱,?？蛇x擇性吸附樣品液中的毒素，從而對樣品起到非常針對性的純化作用,，經過柱凈化后的樣品液可直接用于HPLC分析。它與HPLC配合使用可達到快速測定的目的,，以改善信噪比,，提高檢測方法的準確度。
下面咱們來了解下免疫親和柱的使用技巧,，希望能夠幫助到大家：
1,、上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、無懸浮物,、甲醇濃度不宜過高,。
2、若樣品為復雜樣品,，例如高蛋白,、高油脂、酸性樣品,，可以將提取液分兩次提取樣品,，可以提高提取效果。
3,、樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,，約每秒1-2滴。
4,、抗原抗體發(fā)生反應的最佳溫度是在25℃左右,，實驗需要的環(huán)境溫度應是室溫24℃-28℃，太高或太低的溫度都會對回收率有一定的影響。在使用前需要恢復至室溫再進行實驗,。
5,、不要在無水狀態(tài)下，瓊脂容易干燥縮,，影響質量,。
6、儲存條件為4℃-8℃,。切記0℃以下的低溫,，因為緩沖液凍結，會嚴重影響親和柱內的物理結構,，對質量影響很大,。
7、洗脫一般選擇試劑甲醇,，為增強洗脫效果可加大甲醇體積,。
值得注意的是當測試不同的洗脫條件時，有些緩沖液雖然不能洗脫抗原,，但在其他條件改變后仍可能是有效的洗脫緩沖液,。實際上有些非洗脫緩沖液，可能改變抗原抗體反應的平衡,。例如高鹽條件具有疏水作用,。應用這些條件可以比較容易地收集抗體基質上的抗原。
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