色譜是一種分離分析手段,,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟,。對(duì)糖和有機(jī)酸分析色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,分析速度快等,。其粒度一般為3,5,7,10μm等,,柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效,;對(duì)于同系物分析,,只要500即可;對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬(wàn)的柱子,,因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要,。
糖和有機(jī)酸分析色譜柱是高效液相分離系統(tǒng)的中重要的環(huán)節(jié),根據(jù)極性分為正相柱和反相柱,。正相柱大多以硅膠為柱,,或是在硅膠表面鍵合-CN,,-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)(ODS)稱為C18柱,,其它常用的反相柱還C8,C4,,C2和苯基柱等,。

今天要與大家分享的是糖和有機(jī)酸分析色譜柱的操作方法,希望能夠幫助到大家:
1,、在條件允許情況下,,在使用前對(duì)新色譜柱按照說(shuō)明書方法進(jìn)行柱效測(cè)試,以確保其正常使用,。
2,、所有產(chǎn)品使用溫度應(yīng)低于60℃。
3,、將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中,。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中,。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾,。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑,,為達(dá)到較好峰形,需要降低進(jìn)樣量,。
4,、所有流動(dòng)相,特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相,,當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制,;如果使用了前日配制的流動(dòng)相,請(qǐng)確保流動(dòng)相pH值沒(méi)有變化,,并確保流動(dòng)相沒(méi)有長(zhǎng)菌,。流動(dòng)相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。
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